Colle n°4 QCM 2

[Pépitee]

Bonjour, je n’ai vraiment pas compris le QCM 2 de la colle n°4 (semaine dernière). 

Je ne comprend pas pourquoi la A est vraie (comment on sait exactement combien les fragments mesurent ?) (il n’y a pas de correction pour cet item là)

https://ibb.co/G2hbGFG

[roro.zbr]

Bonjour 

 

Je suis une tutrice, petit problème de compte ;) 

 

QCM 2 - Item A 
Pour connaître les tailles des fragments, il faut regarder 2 choses, d’abord sur le gel d’électrophorèse, tu vérifies si les fragments du clone 3 correspondent à peu près à 2200 et 4200, ici tu vois que c’est bien le cas ! 
Ensuite pour savoir les tailles exactes, il faut regarder les plasmides du QCM 1 et celui obtenu dans le QCM 2
Dans l’énoncé du QCM 2, on nous dit qu’on utilise EcoRI pour le clonage du gène codant pour l’insuline sur pDEF
Sur le plasmide pDEF du QCM 1, l’enzyme EcoRI est présente qu’une fois à 300 pb ce qui permet d’ouvrir le plasmide pour y insérer le fragment de 2600 pb contenant le gène codant pour l’insuline provenant du plasmide pABC coupé par l’enzyme à 300 pb et 2900 pb (2900 - 300 = 2600) 
Comme on utilise qu’une enzyme, le clonage est non-orientée et peut s’insérer dans les 2 sens, on obtient donc le plasmide du QCM 2 avec 6400 pb. 
On nous dit dans l’item A que les fragments sont isolés par Xho1, on regarde donc les coupures à Xho1
Dans le fragment coupé par EcoRI du plasmide pABC, il y’a une coupure par Xho1 à 950
Et l’autre enzyme Xho1 qui est à l’extérieur du fragment rajouté sur le plasmide pDEF est à 550, comme on a rajouté un fragment de 2600pb
2600 + 550 = 3150
Pour obtenir 2200 on fait 3150 - 950 
3150 - 950 = 2200
Le premier fragment est donc bien de 2200
Ensuite, 
On sait que le plasmide obtenu fait 6400 
6400 - 2200 = 4200 -> taille du 2nd fragment 
Les tailles exactes des fragments isolés par Xho1 sont donc bien de 2200pb et 4200pb

 

J’espère que c’est plus clair maintenant pour toi 
Bon courage !! 

[Lulu_le_Fou]

Il y a 4 heures, Pépitee a dit :

Bonjour, je n’ai vraiment pas compris le QCM 2 de la colle n°4 (semaine dernière). 

Je ne comprend pas pourquoi la A est vraie (comment on sait exactement combien les fragments mesurent ?) (il n’y a pas de correction pour cet item là)

https://ibb.co/G2hbGFG

oui voilà je suis d'accord avec Romane ! 

 

Est ce que c'est plus clair ducoup ?

[Pépitee]

Ok merci beaucoup, jai compris tout le raisonnement sauf cette partie.

il y a une heure, roro.zbr a dit :

l’autre enzyme Xho1 qui est à l’extérieur du fragment rajouté sur le plasmide pDEF est à 550, comme on a rajouté un fragment de 2600pb
2600 + 550 = 3150

Pourquoi on fait ce calcul? j’ai compris que cetait pour trouver la taille du fragment d’interet, mais pourquoi on doit faire cette addition au préalable ? (en gros c’est quoi concrètement qui a une taille de 3150 pdb?)

Edited February 11 by Pépitee

[romane.zbr]

Quand tu regardes ton plasmide pDEF, tu remarque que la seule enzyme Xho1 se situe à 550 pb, comme tu vas rajouter ton gène d’intérêt de 2600 pb au niveau de EcoRI (300pb) l’enzyme Xho1 sera décalé de 2600pb, elle sera donc à 3150 pb.

C’est à ça que correspond 3150pb.