C'estPASSimple Posted January 13 Share Posted January 13 Bonjour, je ne comprends pas pourquoi l'item D du QCM 2 session 2 2021/2022 est compté vrai ? Puisque l'on a inséré le promoteur dans le plasmide 2 (qui se situe apres le terminateur du gene resistant au G418) et qu'on a le terminateur après l'ADNc codant le GFP soit avant le gene resistant au G418 , alors pourquoi on dit que les cellules exprimant la GFP sont resistantes au G418 ? (desoléé je n'arrive pas à mettre la photo :/ ) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Tuteur Solution Mitose64 Posted January 13 Tuteur Solution Share Posted January 13 Coucou, Alors en effet le promoteur que l'on a inséré se situe après le terminateur du gène de résistance au G418 (vu qu'il va se situer par exemple entre les sites de restriction de HindIII et EcoR1). Néanmoins, quand tu regardes ton plasmide 2, on peut voir qu'il y a au départ un promoteur eucaryote constitutif juste avant l'ADNc codant la résistance au G418 et c'est ce promoteur qui va permettre l'expression de ce gène et donc la résistance au G418 aux cellules dans lesquelles il est présent (et donc notamment dans les cellules qui expriment la GFP). Les gènes pour la GFP et la résitance au G418 sont exprimés indépendament puisqu'ils ont chacun un promoteur et un terminateur indépendant. Tant que tu as un promoteur qui est adapté à ton type de cellule (c'est à dire procaryote ou eucaryote), l'ADNc qui est juste après va pouvoir être exprimé. Est ce que c'est plus clair pour toi ? Sylicium14 and Lulu_le_Fou 1 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
C'estPASSimple Posted January 13 Author Share Posted January 13 il y a 7 minutes, Mitose64 a dit : Coucou, Alors en effet le promoteur que l'on a inséré se situe après le terminateur du gène de résistance au G418 (vu qu'il va se situer par exemple entre les sites de restriction de HindIII et EcoR1). Néanmoins, quand tu regardes ton plasmide 2, on peut voir qu'il y a au départ un promoteur eucaryote constitutif juste avant l'ADNc codant la résistance au G418 et c'est ce promoteur qui va permettre l'expression de ce gène et donc la résistance au G418 aux cellules dans lesquelles il est présent (et donc notamment dans les cellules qui expriment la GFP). Les gènes pour la GFP et la résitance au G418 sont exprimés indépendament puisqu'ils ont chacun un promoteur et un terminateur indépendant. Tant que tu as un promoteur qui est adapté à ton type de cellule (c'est à dire procaryote ou eucaryote), l'ADNc qui est juste après va pouvoir être exprimé. Est ce que c'est plus clair pour toi ? Ahh d'accord j'avais pas relevé cette subtilité ! merci :) Mitose64 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Tuteur Mitose64 Posted January 13 Tuteur Share Posted January 13 Pas de soucis avec plaisir :) Bonne fin de journée ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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