Agoniste ou agoniste inverse BRET

[mathoulematou]

Bonjour, je ne comprends comment on peut conclure a la nature agoniste ou agoniste inverse dans le cas d'une expérience BRET..
J'ai noté dans mon cours : - qu'un antagoniste entraine une "non dissociation" donc un signal BRET intense

- un agoniste inverse entraine un découplage donc  éloignement donc BRET faible 

- un agoniste une dissociation donc éloignement donc BRET faible 

 

Dans ce cas de qcm (annale 2020 Session 1): je suis donc bloquée car je ne comprends pas ce qui nous permet de conclure a la nature agoniste inverse ou non du med 

 

A. Si le signal diminue c’est que les sous-unités 𝘢 et βɣ s’éloignent, donc il s’agit d’un agoniste. 

Dans tous les cas j'aurais mis faux comme "je ne peux pas le savoir", mais il est explicité dans la correction qu'on le sait, comment ? 

[suzy22]

Salut @mathoulematou,

 

D’abord reprenons le principe d’un BRET: lors de la construction d’un BRET, la Rénilla luciférase est sur sous-unité Gα et la GFP est sur sous-unité β-gamma.

À l’état basal, les 3 sous-unités α, β et gamma sont proche. La distance est faible (< 100 Å) entre les partenaires BRET. Donc il y’a un transfert d’énergie et le signal BRET est intense.
- Si le ligand est un agoniste, il y’a la dissociation de la protéine G. La distance entre les partenaires BRET augmente. Donc il y’a moins de transfert d’énergie et il y’a une diminution du signal BRET concentration-dépendante. C’est à dire que le signal est un paramètre concentration dépendante de l’agoniste, ce qui permet de mesurer l’activation de la protéine G.

 

Donc dans l’item A, il y’a écrit que « la molécule X provoque une diminution concentration dépendante du signal BRET ». Donc plus il y a de molécule X (sa concentration augmente) plus le signal BRET est faible. Si le signal BRET est faible cela signifie qu’il y a une dissociation des sous unités α, β et gamma. Donc la molécule X est un agoniste.