Ouistiti Posted April 14, 2016 Share Posted April 14, 2016 Bonsoir ! J'ai quelques soucis de compréhension pour les items C,D,E du QCM 5 et D,E du QCM 6 du concours de 2014 ! Quelqu'un pourrait il m'expliquer ? Merci ! Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution PauRo Posted April 16, 2016 Solution Share Posted April 16, 2016 Salut ! QCM 5 : C = L'anticorps DN3 reconnait E2, le domaine extra-cellulaire de E2 (qui appartient à E2), mais aussi E4. On pourrait donc penser qu'il est polyclonal puisqu'il reconnait E2 et E4 mais c'est un piège. En effet, il peut très bien reconnaitre un épitope commun à E2 et E4, sans pour autant être polyclonal ! Il a été produit par une seule lignée de plasmocytes, il est donc monoclonal. D = La D est vraie car DN6 reconnait à la fois E2 et le DIC de E2. Donc l'épitope que reconnait DN6 est porté par DIC et non pas par DEC ! E = Tu dois répondre à cette question en deux étapes. Premièrement, tu regardes la première figure, qui est faite en condition non dénaturante, et tu vois que DN4 reconnais bien E2 (E2 et son DEC), et seulement E2 (il ne reconnait pas E4). Puis, tu regardes la seconde figure et tu constates que DN4 ne reconnait plus rien une fois que les surnageants ont été passé en PAGE-SDS. Or, le PAGE-SDS dénature tes protéines, ce qui veut dire que celles qui sont reconnues ne sont plus conformées comme dans le surnageant de départ. DN4 reconnait alors seulement un épitope conformationnel. QCM 6 : D = L'anticorps DN4 est spécifique du DEC de E2, tu le vois sur ta figure 1 en raisonnant comme à l'item D du QCM 5.Donc, tu peux l'utiliser pour purifier ton DEC grâce à une chromatographie d'affinité ( cf cours si tu as oublié le principe ). Une fois que tu l'as purifié, il te suffit de doser sa concentration E = Même chose, DN4 est spécifique du DEC de E2 donc tu peux l'utiliser pour faire une immunoprécipitation avec tes surnageants de culture. Une fois que ton immunoprécipité est réalisé, tu pourras réveler la bande qui correspond à DEC avec un nouvel anticorps (ici DN2) que tu radiomarques par exemple. DN2 est spécifique de DEC tout comme DN4 (même raisonnement encore une fois !). Bon courage pour la suite ! Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ouistiti Posted April 16, 2016 Author Share Posted April 16, 2016 Super nickel merci beaucoup ! j'avais pas le bon raisonnement Bonne soirée ! Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau JulieFinkel Posted April 18, 2016 Ancien du Bureau Share Posted April 18, 2016 Oh PIFO dommage que tu n'aies pas été là la dernière perm j'ai mimé le DEC pour expliquer le QCM ! Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ouistiti Posted April 18, 2016 Author Share Posted April 18, 2016 Oh ben j'ai raté quelque chose pourtant j'y suis allée à la perm ! Tant pis pour moi Link to comment Share on other sites More sharing options...
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