colle n°4

[eliiise]

CORRECTION:

E. On ne peut pas différencier la kératine et le collagène. En effet, suite à l’action du ß-mercaptoéthanol, le collagène est dénaturé en 5 sous-unités de masses égales (homopentamère), soit 5 sous-unités de 60kDa (300/5=60). La kératine étant un monomère de 60kDa, il sera impossible de distinguer ces 2 protéines en chromatographie d’exclusion.

 

 

 

Bonsoir,

je ne suis pas sûre de comprendre la correction de l'item E. J'ai l'impression qu'on parle de deux choses différentes entre l'item et la correction 

Est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer la correction?

Merciii

[Cassolnousmanque2]

Coucou @elsbzd, 

Le bêta mercapto éthanol (BME) va venir couper les ponts disulfure qui existent entre chaque sous unité

La kératine est monomérique = elle a 1 sous unité -> le BME n'aura aucune action dessus => protéine = 60 kDa

La lamine est dimérique = elle a 2 sous unités -> Après action du BME, on aura 2 sous unités de 30 kDa chacune 

Le collagène est homopentamérique = il a 5 sous unités -> Après action du BME, on aura 5 sous unités de 300/5 = 60 kDa chacune 

La ferritine est monomérique = elle a 1 sous unité -> le BME n'aura aucune action dessus => protéine = 440 kDa 

 

Maintenant le principe de la chromatographie d'exclusion c'est de séparer les protéines selon leur masse moléculaire en les faisant passer dans une colonne qui contient des billes avec des pores de différentes tailles 

Dans les conditions dénaturantes qu'on te donne : 

On peut classer les protéines par ordre décroissant de masse moléculaire : 

Ferritine > Collagène = Kératine > Lamine 

Donc la ferritine sera éluée avant le collagène, qui sera élué en même temps que la kératine, qui tous deux seront élués avant la lamine

 

donc si on fait 3 éluats successifs on aura : 

Eluat 1 : Ferritine 

Eluat 2 : Collagène + Kératine 

Eluat 3 : Laminine 

 

=> donc la ferritine et la laminine sont bien séparées mais pas le collagène et la kératine

 

est-ce que tu comprends mieux la correction de l'item ? 

[eliiise]

Il y a 21 heures, Cassolnousmanque2 a dit :

Coucou @elsbzd, 

Le bêta mercapto éthanol (BME) va venir couper les ponts disulfure qui existent entre chaque sous unité

La kératine est monomérique = elle a 1 sous unité -> le BME n'aura aucune action dessus => protéine = 60 kDa

La lamine est dimérique = elle a 2 sous unités -> Après action du BME, on aura 2 sous unités de 30 kDa chacune 

Le collagène est homopentamérique = il a 5 sous unités -> Après action du BME, on aura 5 sous unités de 300/5 = 60 kDa chacune 

La ferritine est monomérique = elle a 1 sous unité -> le BME n'aura aucune action dessus => protéine = 440 kDa 

 

Maintenant le principe de la chromatographie d'exclusion c'est de séparer les protéines selon leur masse moléculaire en les faisant passer dans une colonne qui contient des billes avec des pores de différentes tailles 

Dans les conditions dénaturantes qu'on te donne : 

On peut classer les protéines par ordre décroissant de masse moléculaire : 

Ferritine > Collagène = Kératine > Lamine 

Donc la ferritine sera éluée avant le collagène, qui sera élué en même temps que la kératine, qui tous deux seront élués avant la lamine

 

donc si on fait 3 éluats successifs on aura : 

Eluat 1 : Ferritine 

Eluat 2 : Collagène + Kératine 

Eluat 3 : Laminine 

 

=> donc la ferritine et la laminine sont bien séparées mais pas le collagène et la kératine

 

est-ce que tu comprends mieux la correction de l'item ? 

ah oui okk merci j'étais restée bloquée sur le fait qu'on puisse séparer ferritine et kératine mais du coup j'ai pas fait attention que la laminine était un dimère (et que donc on pouvait séparer la lamine du collagène)

merciii

[Cassolnousmanque2]

Avec plaisir !