futurmedecinaskip Posted February 4, 2023 Share Posted February 4, 2023 Salut, je comprends pas les items A,B et C du qcm 3 S2 - Examen Session 1 - PASS - Sujets - 2021-2022.pdf (tutoweb.org) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Caro-tides Posted February 4, 2023 Share Posted February 4, 2023 Salut ! Tu peux me dire de quelle matière il s'agit dans l'annale? (UE 8 ou 11?) futurmedecinaskip 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
futurmedecinaskip Posted February 4, 2023 Author Share Posted February 4, 2023 il y a 1 minute, Caro-tides a dit : Salut ! Tu peux me dire de quelle matière il s'agit dans l'annale? (UE 8 ou 11?) UE 11 :) Cassolnousmanque2 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Caro-tides Posted February 4, 2023 Solution Share Posted February 4, 2023 Alors: Si on résume les informations du QCM: On a 3 plasmides mais le seul qui nous intéresse pour ces questions est le plasmide C. Dans le plasmide C a été intégré la construction en bas a droite (sur laquelle vont venir se coller les amorces). On utilise ce plasmide sur 2 lignées cellulaires différentes (1 et 2) puis, on fait une RT-PCR (donc à partir d'ARN) et une électrophorèse sur chaque lignée. A : (Vrai) On te demande comment on a sélectionné les cellules qui ont bien intégré le plasmide. On voit que sur le plasmide C, il y a un gène codant la résistance au G418. Les cellules qui auront intégré le plasmides seront résistantes, et les autres non. Cela permet de différencier les cellules chez qui le plasmides a bien été intégré dans leur génome, des autres (chez qui ça n'a pas marché). B: (Faux) Le plasmide code notamment pour le gène 1 et le gène 2. Pour faire la RT-PCR, on utilise différentes amorces qui se collent autour de ces 2 gènes (leurs positions sont indiquées sur le schéma). Sur les résultats de l'électrophorèse, on voit que les cellules de la lignée 2 n'ont pas de résultat. Ici, l'info importante, c'est que c'est une RT-PCR, donc à partir de ARN (et pas de l'ADN). Cela signifie, que les cellules de la lignée 2, ont bien intégré les gènes 1 et 2, mais qu'elles ne les expriment pas. C: (Faux) Les cellules de la lignée 1, ont un résultat pour les amorces B ( 2 et 3) et C ( 2 et 4). L'amorce 2 se positionne sur le gène 1, donc elles l'expriment forcément. (C'est le promoteur qui n'est pas exprimer, ce qui est logique puisqu'il n'est pas transcrit en ARN). Est-ce que c'est plus clair? barbiedocteur, emylyyy, Le_P'tit_Kiwi and 2 others 3 2 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
futurmedecinaskip Posted February 5, 2023 Author Share Posted February 5, 2023 Il y a 18 heures, Caro-tides a dit : Alors: Si on résume les informations du QCM: On a 3 plasmides mais le seul qui nous intéresse pour ces questions est le plasmide C. Dans le plasmide C a été intégré la construction en bas a droite (sur laquelle vont venir se coller les amorces). On utilise ce plasmide sur 2 lignées cellulaires différentes (1 et 2) puis, on fait une RT-PCR (donc à partir d'ARN) et une électrophorèse sur chaque lignée. A : (Vrai) On te demande comment on a sélectionné les cellules qui ont bien intégré le plasmide. On voit que sur le plasmide C, il y a un gène codant la résistance au G418. Les cellules qui auront intégré le plasmides seront résistantes, et les autres non. Cela permet de différencier les cellules chez qui le plasmides a bien été intégré dans leur génome, des autres (chez qui ça n'a pas marché). B: (Faux) Le plasmide code notamment pour le gène 1 et le gène 2. Pour faire la RT-PCR, on utilise différentes amorces qui se collent autour de ces 2 gènes (leurs positions sont indiquées sur le schéma). Sur les résultats de l'électrophorèse, on voit que les cellules de la lignée 2 n'ont pas de résultat. Ici, l'info importante, c'est que c'est une RT-PCR, donc à partir de ARN (et pas de l'ADN). Cela signifie, que les cellules de la lignée 2, ont bien intégré les gènes 1 et 2, mais qu'elles ne les expriment pas. C: (Faux) Les cellules de la lignée 1, ont un résultat pour les amorces B ( 2 et 3) et C ( 2 et 4). L'amorce 2 se positionne sur le gène 1, donc elles l'expriment forcément. (C'est le promoteur qui n'est pas exprimer, ce qui est logique puisqu'il n'est pas transcrit en ARN). Est-ce que c'est plus clair? ouii hyper clair pour la B et C. Par contre, la A j'arrive tjrs pas à choper le truc, si tu pourrais expliciter tes propos un chouia plus Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Cassolnousmanque2 Posted February 5, 2023 Ancien Responsable Matière Share Posted February 5, 2023 Coucou @futurmedecinaskip, je m’appuie sur ce que @Caro-tides t’a dit plus haut Quand tu veux faire un clonage, certaines cellules vont intégrer le plasmide tandis que d’autres ne l’intègreront pas (d’ailleurs il y en a énormément en pratique qui ne l’intègrent pas) La question ici c’est de savoir si les cellules l’ont intégré ou pas Si elles ne l’ont pas intégré, alors en présence de G418 (un antibiotique = celui de la généticine), elles vont mourir puisqu’elles seront sensibles à cet antibiotique là Par contre, si elles l’ont intégré, alors en présence de G418, elles vont survivre parce que sur le plasmide tu as un gène de résistance à G418 qui est sous le contrôle d’un promoteur eucaryote constitutif (donc qui s’exprime dans toutes les cellules) Donc pour récapituler et t’expliquer dans la pratique à quoi ça sert tout ce système là (c’est mieux quand on comprend l’utilité haha), par défaut les cellules sont sensibles aux antibiotiques (c’est pour ça qu’on te donne un antibio quand tu as une infection bactérienne) Mais les plasmides peuvent apporter des gènes de résistance à certains antibiotiques c’est pour cela que les bactéries veulent les garder donc en gros c’est un peu la compétition entre toi qui veux tuer les bactéries en donnant un max d’antibiotiques, et la bactérie qui veut survivre en intégrant des plasmides de résistance barbiedocteur, Le_P'tit_Kiwi and futurmedecinaskip 1 1 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
futurmedecinaskip Posted February 5, 2023 Author Share Posted February 5, 2023 il y a 7 minutes, Cassolnousmanque2 a dit : Coucou @futurmedecinaskip, je m’appuie sur ce que @Caro-tides t’a dit plus haut Quand tu veux faire un clonage, certaines cellules vont intégrer le plasmide tandis que d’autres ne l’intègreront pas (d’ailleurs il y en a énormément en pratique qui ne l’intègrent pas) La question ici c’est de savoir si les cellules l’ont intégré ou pas Si elles ne l’ont pas intégré, alors en présence de G418 (un antibiotique = celui de la généticine), elles vont mourir puisqu’elles seront sensibles à cet antibiotique là Par contre, si elles l’ont intégré, alors en présence de G418, elles vont survivre parce que sur le plasmide tu as un gène de résistance à G418 qui est sous le contrôle d’un promoteur eucaryote constitutif (donc qui s’exprime dans toutes les cellules) Donc pour récapituler et t’expliquer dans la pratique à quoi ça sert tout ce système là (c’est mieux quand on comprend l’utilité haha), par défaut les cellules sont sensibles aux antibiotiques (c’est pour ça qu’on te donne un antibio quand tu as une infection bactérienne) Mais les plasmides peuvent apporter des gènes de résistance à certains antibiotiques c’est pour cela que les bactéries veulent les garder donc en gros c’est un peu la compétition entre toi qui veut tuer les bactéries en donnant un max d’antibiotiques, et la bactérie qui veut survivre en intégrant des plasmides de résistance ça marche hyper clair mercii !! Cassolnousmanque2 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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