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Détail juste pour être sûre protéines


Anaëlle2022
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  • Responsable Matière

Saluuut

Je voulais être sûre d'un truc, c'est pas ouf de créer un sujet juste pour ça mais bon tan tant pis mdr

Est-ce qu'on est d'accord que la chromatographie échangeuse d'ions et l'IEF font en soi exactement la même chose ?? Juste que le premier est pour la purification et le deuxième pour l'analyse mais on est quand même pareil sur la démarche pI/ pH ?

 

Merciiii

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  • Responsable Matière
  • Solution
il y a 12 minutes, Anaëlle2022 a dit :

Je voulais être sûre d'un truc, c'est pas ouf de créer un sujet juste pour ça mais bon tan tant pis mdr

Est-ce qu'on est d'accord que la chromatographie échangeuse d'ions et l'IEF font en soi exactement la même chose ?? Juste que le premier est pour la purification et le deuxième pour l'analyse mais on est quand même pareil sur la démarche pI/ pH ?

oui le mode de raisonnement est le même et on joue avec les propriétés physiques des protéines,

après le but est totalement différent comme tu l'as très bien dit et le fonctionnement est différent (y'en a 1 avec une colonne stationnaire avec l'élution et tout...)

L'autre est une électrophorese 

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  • Ancien Responsable Matière

Coucou @Anaëlle2022

alors je comprends ce que tu voulais dire mais pour moi ce sont deux choses différentes au moins dans le principe 

la chromatographie échangeuse d'ions va te permettre de récupérer les protéines chargées + ou - en fonction de la propriété de la colonne que tu choisis (échangeuse d'anions ou échangeuse de cations) et donc si plusieurs protéines sont chargées + sur une colonne échangeuse de cations et qu'on augmente la force ionique d'un coup, on récupèrera toutes ces protéines dans le même échantillon (du coup, niveau purification on n'est pas au top)

Alors qu'en faisant une IEF on les aurait probablement mieux séparées 

 

Pour récupérer seulement 1 protéine, il faudrait s'assurer qu'on récupère seulement 1 protéine chargée + parmi un échantillon constitué uniquement de protéines chargées - (et contenant un seul type de protéine chargée +)

 

Donc l'IEF est plus précis je pense que la chromatographie échangeuse d'ions => les deux techniques sont plutôt complémentaires

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