Sylicium14 Posted December 2, 2022 Posted December 2, 2022 Salut, Je suis tombé sur l'item D mais il me dérange un peu, puisqu'en TD il me semblait avoir entendu qu'on réalisé "une électrophorèse sur gel agarose du produit PCR" essentiellement pour rechercher des mutations, mais que pour vérifier si l'amplification avait fonctionné elle n'était nécessaire puisqu'il suffisait juste de regarder sur le tracé obtenu au bout des 30 à 40 cycles. Si quelqu'un pourrait éclaircir ce point :) Merci d'avance pour votre aide https://zupimages.net/viewer.php?id=22/48/cwxq.jpg Quote
Ancien Responsable Matière Solution Cassolnousmanque2 Posted December 2, 2022 Ancien Responsable Matière Solution Posted December 2, 2022 Coucou @Sylicium14, En fait si tu sais à quelle taille de fragments t'attendre, tu pourras faire une électrophorèse et voir si tu as une bande à la taille attendue Si tu n'as pas de bande, alors probablement que la PCR n'a pas fonctionné (les amorces n'étaient pas les bonnes, il manquait quelque chose dans ta préparation) ou alors elle a fonctionné mais comme tu l'as dit on n'a pas fait assez de cycles (<30-40) donc on ne détecte rien Je ne sais pas si ça répond vraiment à ta question ou pas, n'hésite pas à me le dire si tu as d'autres questions Bon courage ! Quote
Sylicium14 Posted December 2, 2022 Author Posted December 2, 2022 Ok oui ça y répond merci bcp ! Et oui j'avais une autre question par rapport au télomérase concrètement c'est quoi son rôle, dans quel processus elle intervient (réplication, transcription,...) ? Parce que je suis tombé dessus tout à l'heure en faisant les QCM du poly de l'avent mais j'en avait jamais entendu parler donc ça m'inquiète ! Merci pour ton aide ;) Quote
Ancien Responsable Matière Cassolnousmanque2 Posted December 2, 2022 Ancien Responsable Matière Posted December 2, 2022 @Sylicium14Alors la télomérase c'est l'enzyme qui va te permettre de répliquer les télomères aux extrémités de tes chromosomes Elle n'est pas exprimée dans la majorité des cellules, et donc à chaque division tu as un raccourcissement des télomères (car les extrémités 5' de chaque brin ne sont pas comblées par de l'ADN venant de l'ADN polymérase) donc au final tu perds des séquences télomériques à chaque division Après environ 50 divisions, tu atteins la limite de Hayflick, c'est à dire que ton potentiel de division cellulaire est épuisé et donc la cellule ne se divisera plus, entrera en sénescence et puis plus tardivement en apoptose Ce processus permet donc l'homéostasie tissulaire Cependant, dans les cellules embryonnaires, les cellules souches et les cellules tumorales notamment, la télomérase est active (les cellules cancéreuses réexpriment le gène qui permet d'avoir la télomérase) et donc les télomères sont répliqués à chaque division, il n'y a donc pas de raccourcissement télomérique après chaque division cellulaire -> donc pas de limite de Hayflick atteinte -> donc pas de sénescence -> donc pas d'apoptose -> donc pas de mort cellulaire = la cellule devient immortelle et ne répond plus aux mécanismes de maintien de l'homéostasie tissulaire Voila en gros le résumé sur la télomérase, sinon tu peux aussi aller voir les diapos 105 à 109 du Pr Couderc ;) Bon courage et désolé pour cette réponse tardive Sylicium14 and Midwiflower 1 1 Quote
Sylicium14 Posted December 3, 2022 Author Posted December 3, 2022 Super !! Merci bcp pour ton aide ;) Quote
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