Tuteur emmacrophage Posted November 21, 2022 Tuteur Share Posted November 21, 2022 coucou, j'ai un peu de mal avec les 3 premiers items de ce qcm, est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer ? merci !! :) QCM 16 - La séquence synthétique d'ADN double brin suivante est marquée au 3H sur la cytosine (14C). Un des brins présente une coupure représentée par ---------------. 5 ' GGGGGGGGGGG ------------------ TTTTTTTTTTTTT 3’ 3’ CCCCCCCCCCCCCCCCCCAAAAAAAAAAAAAAAA 5’ On fait agir l'ADN polymérase I de E. coli en présence de (γ32P) dGTP, 3H (= hydrogène tritié) dTTP, dATP et de dCTP et de tous les cofacteurs nécessaires au fonctionnement de l'ADN polymérase I, ainsi qu'une ligase. A la fin de l'expérience, après analyse de l'ADN et du milieu réactionnel, on observe : A. Une incorporation de 14C dans l’ADN. B. Une augmentation de 3H dans l’ADN. C. Une libération de 32P. Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution EleonoreGrs Posted November 21, 2022 Solution Share Posted November 21, 2022 Coucou ! L'item A est faux car il n'y a pas besoin d'avoir de la cytosine incorporée suite à cette lésion donc pas d'incorporation de 14C dans l'adn. En revanche de la thymine devra être incorporée en face de la cytosine donc cela va augmenter la présence de 3h dans l'adn car la thymine est marquée à l'hydrogène tritié. L'item B est donc vrai. manganèse 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
manganèse Posted November 21, 2022 Share Posted November 21, 2022 Bonjour @emmacrophage, Ici il faut bien comprendre que le 3H, et le 32P sont des marqueurs qui te permettent de localiser les éléments auxquels ils sont associés. 3H--> dTTP 32P--> dGTP En sachant ceci il ne reste plus qu'à se demander comment la polymérase va réparer le brin. Pour la question A on sait que l'ADN doit être complémentaire les bases qui seront donc incorporés à l'ADN seront des T et des G. Le 14C correspondant à la cytosine on peut donc dire qu'il ne sera pas incorporé. De même pour la B vu que l'on va incorporer de la thymine dans notre ADN le taux de 3H étant lié à la thymine va augmenter lui aussi. Quand à la C on parle ici de libération et non d'incorporation, ce qui veut dire qu'on augmenterait la présence de 32P dans le milieu (= en dehors de l'ADN). Ce qui n'est pas le cas ici puis que ta guanine est incorporée à l'ADN. Et que l'activité exonucléasique de la pol I libère des G non marqués au 32P (ceux déjà présent dans l'ADN). EleonoreGrs 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
EleonoreGrs Posted November 21, 2022 Share Posted November 21, 2022 Pour l'item C, il y a une errata selon moi. J'aurai dis vrai car lors de l'incorporation d'un nouveau nucléotide on libère le phosphate en beta et en gamma, seul celui en alpha reste. Ici le phosphate en gamma de la guanine est marqué donc il y aura une libértion de y32P. qui ne sera pas incorporé à l'adn. Voila, j'espère avoir pu t'aider! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Tuteur emmacrophage Posted November 21, 2022 Author Tuteur Share Posted November 21, 2022 @EleonoreGrs merci :) c'est beaucoup plus clair !! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Cassolnousmanque2 Posted November 21, 2022 Ancien Responsable Matière Share Posted November 21, 2022 Coucou, @emmacrophage, @EleonoreGrs, Pour moi ce n'est pas un errata. Le dGTP 32P est marqué en gamma donc par la libération du pyrophosphate il n'y a aucune raison d'avoir une libération de 32P Donc l'item C reste bien faux Bon courage Psykokwak and emmacrophage 1 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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