une_PASSionnée Posted March 21, 2022 Share Posted March 21, 2022 heyyy qlqn peut me dire comment différencier une chromato d'affinité s'une chromto d'excxlusion rien que par le chromatogramme associé svp ? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Analyse Posted March 21, 2022 Solution Share Posted March 21, 2022 Salut ! La chromatographie d'exclusion va faire sortir les molécules par taille décroissante. Donc tu obtiendras des pics en fonction de la taille des molécules dans ton mélange. Par exemple si t 'as 2 molécules dans ton mélange une qui fait 40kDa et une qui fait 80kDa tu obtiendra 2 pics avec le premier pic qui correspond à la molécule due 80kDa. Alors que pour la chromatographie d'affinité les molécules d'intérêt vont se fixer sur la colonne lorsque tu verses ton mélange et les protéines qui ne t'intéressent pas vont directement sortir de la colonne. Ensuite, tu fais une élution ce qui va te permettre de décrocher les molécules d'intérêt et de les faire sortir de la colonne. Donc tu va obtenir un premier pic avec les molécules qui ne t'intéresses pas (quand tu as versé le mélange dans la colonne) et un deuxième pic avec la molécule d'intérêt obtenue lors de l'élution. J'espère que ça t'as aidé ! Bon courage ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
une_PASSionnée Posted March 21, 2022 Author Share Posted March 21, 2022 merci je comprends le mécanisme je parle de comment les repérérer en fonct° du chromatogramme proposé j'ai l'impression que ça a la mm tete :) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Analyse Posted March 22, 2022 Share Posted March 22, 2022 Salut ! Pour la chromatographie d'affinité tu auras normalement un grand pic qui correspond aux protéines non retenues et un 2ème plus fin qui correspond aux protéines d'intérêt retenues. Alors que pour la chromatographie d'exclusion tu auras un nombre de pics qui correspond au nombre de protéines différentes avec la largeur des pics qui correspond à la quantité de ces protéines. Mais si tu as des protéines qui ont une taille proche tu peux avoir un pic qui regroupe plusieurs protéines différentes. Après les 2 chromatogrammes peuvent se ressembler si par exemple tu as sur la chromatographie d'exclusion une protéine de faible taille en grande quantité et une 2ème protéine plus grosse en moins grande quantité. C'est plus clair ? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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