lilarsenic Posted March 18, 2022 Share Posted March 18, 2022 Salut, Par rapport à l'item A de ce QCM (faux) : La correction détaillée du TAT dit que l'amorce 2 est mal placée et je comprends pourquoi mais ici, vu qu'on fait un séquençage selon Sanger, on n'utilise pas qu'une seule amorce dans tous les cas ? Merci ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Abracaadabra Posted March 19, 2022 Solution Share Posted March 19, 2022 Salut, dans Sanger on utilise une amorce par brin à séquencer. Là dans ton plasmide l'ADNc est double brin. T'auras besoin de 2 amorces pour séquencer chacun des brins complémentaires. Dans tous les cas l'item est faux car même si on utilisait que l'amorce 2, qui est mal placée car elle est dans la séquence qu'on veut séquencer, à l'issue du séquençage il manquerait le début de la séquence du gène. Il faut que tes amorces soient en dehors du gène à séquencer. pas dessus. Voila j'espère que ça t'a aidé.:) lilarsenic and IceTea 2 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
clemtlr Posted March 19, 2022 Share Posted March 19, 2022 bonjour je ne comprends pas le pricnipe du séquençage sanger, genre comment doit-on interpreter les résultats une fois qu'on a notre sequence (lue de bas en haut, ça j'ai retenu!) -> à quoi correspond la séquence ? ->que doit-on en déduire ensuite ? quel est le brin matrice et tout ? merci d'avance Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
lilarsenic Posted March 20, 2022 Author Share Posted March 20, 2022 Le 19/03/2022 à 12:08, Abracaadabra a dit : Salut, dans Sanger on utilise une amorce par brin à séquencer. Là dans ton plasmide l'ADNc est double brin. T'auras besoin de 2 amorces pour séquencer chacun des brins complémentaires. d'accord j'avais pas saisi cette subtilité merci !! Abracaadabra 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Abracaadabra Posted March 21, 2022 Share Posted March 21, 2022 (edited) Le 19/03/2022 à 20:06, tellierclementine a dit : bonjour je ne comprends pas le pricnipe du séquençage sanger, genre comment doit-on interpreter les résultats une fois qu'on a notre sequence (lue de bas en haut, ça j'ai retenu!) -> à quoi correspond la séquence ? ->que doit-on en déduire ensuite ? quel est le brin matrice et tout ? merci d'avance Salut, alors je vais essayer de t'expliquer simplement. Au départ t'as un brin d'ADN dont tu ignores quelle est la séquence de nucléotides et tu veux enfaite connaitre cette séquence = ADN d'intérêt= brin matrice. Alors tu prends une amorce qui s'hybride avec ton ADN d'intérêt. Tu rajoutes la polymérase, des désoxynucléotides, des didésoxynucléotides, du sel+eau. Donc la polymérase va partir de l'amorce et va synthétiser le brin complémentaire à ton ADN d'intérêt. (ici elle va allonger la partie jaune) Quand l'enzyme tombe sur un didésoxynucléotide, la synthèse s'arrête. Donc à la fin de ton séquençage tu obtiens la séquence complémentaire de celle que tu cherchais au départ. (en orange ). Faut la lire sur le gel d'électrophorèse de bas en haut. ici tu lis: 5'...ATCGTTGA...3' Pour trouver la séquence de ton brin matrice= ton ADN d'intérêt, il faut juste écrire le brin complémentaire à celui que tu as lu sur le gel: 3'....TAGCAACT...5' (sur la diapo les orientations sont juste inversées mais c'est la même chose ) Voilà j'espère que c'est un peu plus clair . Edited March 21, 2022 by Abracaadabra clemtlr and Calimera 1 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
clemtlr Posted March 22, 2022 Share Posted March 22, 2022 AH MAIS de ouf merci beaucoup!!!! Abracaadabra 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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