QCM 8 étude des protéines

[lilarsenic]

Bonjour,

 

Je comprends pas pourquoi cet item est vrai : "Le vecteur d'expression contenant la cassette d'expression doit être spécifique de l'organisme producteur". 

Je pense que je m'embrouille dans la manière de voir les choses mais on utilise tout le temps des plasmides comme vecteurs donc des vecteurs d'expression provenant des bactéries. Pourtant après ces plasmides on va les mettre dans l'ADN d'animaux par exemple pour exprimer une protéine en particulier donc l'organisme producteur a un vecteur d'expression "étranger" ? 

 

J'espère que je suis claire, mercii d'avance 

[choLOLApine]

helloooo

alors je pense que pour éviter de s'embrouiller, il faut bien garder en tête que quand on parle de cassette d'expression c'est l'ensemble ADNc + son promoteur et son terminateur!

effectivement comme tu l'as dit on utilise les plasmides comme vecteur, donc bien des organismes bactériens, à partir desquels on va isoler l'ADNc, ensuite pour que les gènes contenus dans l'ADNc que l'on a isolé puissent s'exprimer dans l'organisme receveur, il faut que le promoteur soit bien spécifique de cet organisme!

si on récupère la cassette entière (promoteur + ADNc + terminateur) du plasmide, qu'on l'intègre dans le noyau d'une cellule de souris, aucune chance que ta protéine d'intérêt soit exprimé, pour ça il faut récupérer uniquement l'ADNc, puis l'intégrer dans un plasmide receveur dans lequel on a déjà placé un promoteur eucaryote!

au final la cassette d'expression, même si elle est transportée par un vecteur bactérien (un plasmide) est bien spécifique de l'organisme eucaryote, le plasmide n'exprimera pas la protéine, mais la souris une fois transfectée pourra l'exprimer! 

 

j'espère que c'est plus clair pour toi, bon courage!! 

[lilarsenic]

c'est très très clair merci beaucoup pour ta réponse complète !!

bonne soirée !