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Chromatographie échangeuse d'ions


yeisir
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  • Ancien Responsable Matière

Salut, 

Alors je n'ai pas trop compris comment ça marche la chromatographie échangeuse d'ions et aussi cette partie du diapo:

"Élution : • augmentation de la force ionique du tampon d’élution (NaCl) • modification du pH pour le tampon d’élution"

Merci au bg/blg qui me répondra

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  • Solution

coucou, je vais essayer de t’expliquer (pas sur que ce soit vraiment juste et bien expliqué ahah) 

alors pour une echangeuse d’ion c’est comme en biochimie du S1 : ta proteine va etre chargée donc va etre retenu par l’échangeuse. 

si tu as un ph<phi : ta molécule sera chargée + et donc retenue sur une colonne echangeuse de cation (qui est chargée -) 

si tu as un ph>phi : molécule chargée - et donc retenue par une colonne echangeuse d’anion (chargée +) 

 

ensuite pour récupérer tes proteines tu vas avoir donc l’étape de l’élution et tu as deux étapes : 

- augmentation de la force ionique : ici tu vas augmenter la concentration en NaCl ce qui va donner des anions et cations qui vont rentrer en compétition avec la proteine => ca va faciliter le départ de la proteine puisque les ions vont prendre sa place 

- modification du ph, si tu le modifie tu vas changer les charges de la proteine et tu vas meme pouvoir l’annuler si tu le veux pour permettre donc a la proteine de « partir » de la colonne 

 

Je ne sais pas du tout si j’ai bien répondu a ta question, dis moi si tu as besoin d’autre chose ! :) 

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