Membres PassPartout_ Posted January 5, 2022 Membres Posted January 5, 2022 Salut, J'arrive pas à comprends la correction de l'item C de ce qcm : Correction : • Si le promoteur n’est pas intégré, on obtiendra 1 fragment de 5200 pb. • Si le promoteur est intégré dans le bon sens, on obtiendra 2 fragments de 150 et 5850 pb. • Si le promoteur est intégré dans le mauvais sens, on obtiendra 2 fragments de 750 et 5250 pb. Comment on fait pour trouver la longueur des fragment quand le promoteur est intégré ? Merci d'avance <3 Quote
Ancien du Bureau Solution Dr_Zaius Posted January 5, 2022 Ancien du Bureau Solution Posted January 5, 2022 Yo @PassPartout_ ! Alors d'abord il faut regarder le premier plasmide on voit qu'entre les 2 séquences BamH1 il y a le promoteur et juuuuuuste après tu as un Pst1 : (je reprends pas le cas où le promoteur n'est pas intégré) Si le promoteur est intégré alors il y a 2 séquences Pst1 dans le plasmide recombinant, et vu qu'on a utilisé uniquement une enzyme de restriction pour BamH1 et pas BamH1 + X(genre Xho1) il peut y avoir insertion dans le "bon" et dans le "mauvais" sens du promoteur. Dans le cas où tu as une insertion dans le bon sens il y a insertion de la séquence entre les 2 BamH1 du premier plasmide de taille (1600 - 800 = 800 b) donc on a un plasmide recombinant de 5200 + 800 = 6000 b. Puis on coupe au niveau des 2 sites de restriction Pst1 et là un peu plus complexe il faut trouver la taille de la séquence: - dans le premier plasmide Pst1 est 100 b avant BamH1 donc maintenant si on l'insère dans l'autre plasmide il faut le faire au niveau de la zone BamH1 de ce dernier ! Et cette zone à 50 b avant un Pst1, donc au final tu te retrouvera avec un Pst1 150 b AVANT le deuxième qui était déjà présent... Peut-être que ça te suffit pour faire dans l'autre sens le mauvais, jsp dis moi et si jamais je détaillerai le second je vais essayer de te pondre un schéma mais je garanti rien ^^ Quote
tutoweb Posted January 5, 2022 Posted January 5, 2022 merci c'est super bien expliqué ! et pour celui dans le mauvais sens comment trouvons-nous 750? Car je me suis dis que il fallait regardé après le pst1 c'est à dire hindIII mais je ne pense pas qu'on puisse zapper le BamH1, donc je ne vois pas comment faire.. Quote
Membres PassPartout_ Posted January 5, 2022 Author Membres Posted January 5, 2022 Il y a 2 heures, Dr_Zaius a dit : Yo @PassPartout_ ! Alors d'abord il faut regarder le premier plasmide on voit qu'entre les 2 séquences BamH1 il y a le promoteur et juuuuuuste après tu as un Pst1 : (je reprends pas le cas où le promoteur n'est pas intégré) Si le promoteur est intégré alors il y a 2 séquences Pst1 dans le plasmide recombinant, et vu qu'on a utilisé uniquement une enzyme de restriction pour BamH1 et pas BamH1 + X(genre Xho1) il peut y avoir insertion dans le "bon" et dans le "mauvais" sens du promoteur. Dans le cas où tu as une insertion dans le bon sens il y a insertion de la séquence entre les 2 BamH1 du premier plasmide de taille (1600 - 800 = 800 b) donc on a un plasmide recombinant de 5200 + 800 = 6000 b. Puis on coupe au niveau des 2 sites de restriction Pst1 et là un peu plus complexe il faut trouver la taille de la séquence: - dans le premier plasmide Pst1 est 100 b avant BamH1 donc maintenant si on l'insère dans l'autre plasmide il faut le faire au niveau de la zone BamH1 de ce dernier ! Et cette zone à 50 b avant un Pst1, donc au final tu te retrouvera avec un Pst1 150 b AVANT le deuxième qui était déjà présent... Peut-être que ça te suffit pour faire dans l'autre sens le mauvais, jsp dis moi et si jamais je détaillerai le second je vais essayer de te pondre un schéma mais je garanti rien ^^ Merci beaucoup pour ton explication elle est top (comme d'hab)!! Je crois avoir compris mais si tu as le temps de m'expliquer pour le mauvais sens je suis preneuse ! Sinon ne t'embête pas j'essaierais d'aller à la perm demain Quote
léloupp Posted January 9, 2022 Posted January 9, 2022 Le 05/01/2022 à 20:53, PassPartout_ a dit : Merci beaucoup pour ton explication elle est top (comme d'hab)!! Je crois avoir compris mais si tu as le temps de m'expliquer pour le mauvais sens je suis preneuse ! Sinon ne t'embête pas j'essaierais d'aller à la perm demain salut il vient d'ou le qcm stp Quote
Membres PassPartout_ Posted January 9, 2022 Author Membres Posted January 9, 2022 il y a 3 minutes, léloupp a dit : salut il vient d'ou le qcm stp purée dsl j'avais pas vu ! il vient d'une fiche astuce du TAT : https://tutoweb.org/PDFs/Librairie/Innovations Pédagogiques/Fiches astuces/S2/PASS/S2 - Fiche Astuce - PASS - Recherche (Vecteurs et Plasmides).pdf Quote
léloupp Posted January 9, 2022 Posted January 9, 2022 il y a 51 minutes, PassPartout_ a dit : purée dsl j'avais pas vu ! il vient d'une fiche astuce du TAT : https://tutoweb.org/PDFs/Librairie/Innovations Pédagogiques/Fiches astuces/S2/PASS/S2 - Fiche Astuce - PASS - Recherche (Vecteurs et Plasmides).pdf tqtt mercii PassPartout_ 1 Quote
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