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Sonde marquée


Edmée31
Go to solution Solved by PierreJ-F,

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Bonjour,

dans le cours de génome nous avons un qcm que l'on a fait en cours :

"Soit la séquence en nucléotides suivantes :

5' ACGGTCTA.....TGAGA 3'

3' TGCCAGAT.....ACTCT 5'

Cette séquence est clonée derrière un promoteur et je désire synthétiser une sonde grâce à de l'arn polymérase.

 

C. Je pourrai obtenir une sonde marquée si dans mon milieu réactionnel j'utilise du gamma P32 UTP --> Faux

d. même phrase mais avec avec alpha P32 UTP --> Vrai

e. avec gamma P32 ATP --> Vrai "

 

Je ne comprend d'où viennent les gamma p 32 ATP et tout ça...

 

 

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  • Solution

Comme la prof vous l'a sûrement dit en cours, une sonde est marquée grâce à des acides nucléiques radioactifs comme le 32P.

Lorsque l'ont marque une séquence avec du Gamma 32P NTP, seul le premier nucleotide de la séquence sera marqué (en effet seul le premier nucleotide d'une séquence garde ses trois phosphates Alpha, bêta, gamma). Donc ici en observant la séquence, le marquage à l'aide d'un Gamma 32P NTP ne sera possible qu'à l'aide d'un ATP.

Pour un marquage visible sur tout le long de la sonde voulue, on utilise des acides nucléiques avec leur phosphate en alpha radioactif, du coup ici on peut bien utiliser du alpha 32PUTP (Comme on aurait pu utiliser du alpha32P ATP, UTP ou GTP)

J'espère que j'ai été clair ^^

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