Tampon de lyse

[synyannthrose]

Bonsoir en révisant je me rend compte que je n'est pas parfaitement saisi le principe du tampon de lyse. Est-ce que ce serait possible de faire un petit rappel ?

 

Merci à celle/celui qui pourra me répondre

[vb27]

Bonsoir, 

du coup le tampon de lyse permet l'extraction des protéines à partir d'organe, de tissus ou de cellules.

Qu'aimerais tu qu'on te rappelle exactement?

Edited March 14, 2021 by vb27

[synyannthrose]

@vb27 d'accord mais comment il fonctionne ? Il rend les membrane perméables non ?

[Le_Cupcake]

Coucou @jean, je te fais un petit topo en m'appuyant sur mes bases de pharma, c'est une réponse un peu plus approfondis 

 

But de tampon de lyse : lyser les cellules pour en extraire une protéine/un ARN/un ADN.

Déjà, ton tampon de lyse aura une composition différente en fonction de ce que l'on veut extraire.

Prenons le cas d'une protéine (c'est ce que vous voyez), le tampon de lyse sera composé de :

- Une solution tampon qui va éviter les trop grande variation de pH qui dénaturerai notre protéine d'intérêt.

- Des sels qui maintiennent l'isotonie. Ce sont également des co-facteurs de DNases/RNases.

- Des anti-oxydant pour éviter la dégradation de nos protéines d'intérêts.

- Des DNases/RNases qui vont dégrader le matériel génétique parce que, ce qu'on veut, c'est des protéines.

- Des inhibiteurs de protéases et de phosphatases : ils empêchent la dégradation de nos protéines d’intérêt en inhibant ce qui les dégrade.

- Des détergents : Ils favorisent la lyse des membranes bactériennes en d'intercalant dans la membrane ce qui va la perméabiliser.

- Des lysozymes : Ils permettent une lyse enzymatique des bactéries en hydrolysant des composants de membrane bactérienne.

On peut également compléter la lyse enzymatique en s'aidant d'une lyse mécanique (par ultrasons) et d'une lyse chimique.

 

Si on extrait de l'ARN, et bien on aura des protéases et des phosphatases et des inhibiteurs de Dnases/Rnases et quelques différences par rapport à ce tampon de lyse pour favoriser au mieux l'extraction de ce qui nous intéresse. Mais bon vous le voyez pas cette année donc retient juste l'extraction protéique.

 

Voilà j'espère que c'est plus clair, bonne journée ! 

[synyannthrose]

super merci beaucoup @Le_Cupcake