microtubulou Posted February 2, 2021 Share Posted February 2, 2021 (edited) Salut! je suis en train de faire une annale pour bosser la recombinaison génétique et tout ça: https://zupimages.net/viewer.php?id=21/05/j9uc.png et https://zupimages.net/viewer.php?id=21/05/72rk.png et je ne comprend pas pourquoi les tailles des fragments changent selon le sens de lecture (pour l'enzyme Hind3) quand on a insertion de l'ADNc... Désolée c'est pas hyper pratique, et peut être que c'est juste un détail non capital Voilà merci! Edited February 2, 2021 by lou3008 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Hestia Posted February 2, 2021 Solution Share Posted February 2, 2021 (edited) Hey ! Alors dans ton ADNc qu'on va rajouter on va avoir un site de restriction supplémentaire sur le vecteur, ce dernier est HindIII. Il y aura donc deux sites de coupure pour HindIII. Cependant ce site de restriction qu'on rajoute n'est pas à la même distance des d eux bouts de l'ADNc ce qui va entrainer en fonction de son sens une coupure a deux endroits différents. C'est vraiment galère à expliquer donc je te fais un petit dessin moche. Dit moi si tu as compris sinon je retenterais autre chose ! Edited February 3, 2021 by Hestia microtubulou and Paul__onium 2 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
microtubulou Posted February 3, 2021 Author Share Posted February 3, 2021 oui totalement, merci! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
microtubulou Posted February 3, 2021 Author Share Posted February 3, 2021 (edited) Nouvelle question (PASS = une suite infinies d'interrogations diverses et variées) https://zupimages.net/viewer.php?id=21/05/vys6.png Dans ce qcm, on veut faire s'exprimer un gène sous le promoteur d'un autre gène; est ce que dans tous les cas comme celui-ci, on doit intégrer dans le plasmide, en plus de l'ADN pour le gène qu'on veut exprimer + le promoteur, l'ADN pour le gène que code initialement le promoteur ? Et est ce que le promoteur ne va s'exprimer que dans les cellules qui expriment normalement "son" gène initial ? Je sais pas si ma question est hyper claire, mais du coup la A est juste et la E est fausse, d'où cette question que je me pose Merci ! Edited February 3, 2021 by lou3008 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
oceqne Posted February 3, 2021 Share Posted February 3, 2021 il y a 52 minutes, lou3008 a dit : Nouvelle question (PASS = une suite infinies d'interrogations diverses et variées) https://zupimages.net/viewer.php?id=21/05/vys6.png Dans ce qcm, on veut faire s'exprimer un gène sous le promoteur d'un autre gène; est ce que dans tous les cas comme celui-ci, on doit intégrer dans le plasmide, en plus de l'ADN pour le gène qu'on veut exprimer + le promoteur, l'ADN pour le gène que code initialement le promoteur ? Et est ce que le promoteur ne va s'exprimer que dans les cellules qui expriment normalement "son" gène initial ? Je sais pas si ma question est hyper claire, mais du coup la A est juste et la E est fausse, d'où cette question que je me pose Merci ! Je me permets de te répondre du coup ! 1) Si j'ai bien compris ta question, la réponse serait : non pas tout à fait! En fait, tu vas mettre le gène que tu veux exprimer (ici la GFP), et ce gène sera entouré de zones d'homologies, en gros il sera entouré des séquences d'ADN qui entourent le gène que tu veux remplacer (qui est naturellement présent chez la souris). Ces zones d'homologies sont celles qui permettent de faire la reconnaissance, et du coup la recombinaison. 2) Et du coup, ici, comme on utilise un promoteur qui s'exprime uniquement dans le cerveau et le foie, et bien ça ne bouge pas, le GFP sera exprimé uniquement dans le foie et le cerveau. (Je sais pas si c'est super super clair haha) Hestia and Paul__onium 2 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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