inji_sadek52 Posted January 6, 2021 Share Posted January 6, 2021 Bonjour, Je ne comprend pas pourquoi on a besoin de denaturer les fragments obtenus et separer les brins, c'est quoi le but? https://zupimages.net/viewer.php?id=21/01/o2s1.png merci!! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Solution Sarhabdomyocyte Posted January 6, 2021 Ancien Responsable Matière Solution Share Posted January 6, 2021 Coucou !! Si tu as bien compris le séquençage Sanger, tu sais que le but est de faire migrer les brins d’ADN obtenus en fonction de leur taille/poids moléculaire pour savoir quel ddNTP a été inséré à telle distance du 3’. A la base, quand on a fait l’expérience de synthèse des brins avec des dNTP et des ddNTP, les brins matrices (les « modèles ») ont été couplés à des amorces puis une ADN polymérase a construit le complémentaire de la matrice avec les nucléotides présents dans le tube à essai. En dénaturant l’ADN à la fin de l’expérience, tu sépares le brin complémentaire nouvellement synthétisé de la matrice. En soi, je pense qu’on aurait aussi pu faire migrer l’ADN sans le dénaturer, si les brins matrices avaient tous la même longueur de base ça n’aurait pas faussé le résultat. Mais dans l’éventualité où ce n’était pas le cas, alors il vaut mieux dénaturer. J’espère que c’est plus clair pour toi Bon courage et plein de force à toi inji_sadek52 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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