Ancien Responsable Matière shasha99 Posted January 5, 2021 Ancien Responsable Matière Share Posted January 5, 2021 (edited) Bonsoir J'ai quelques petites question à vous poser concernant ce qcm je ne comprend pas comment on arrive à voir les bandes qui correspondent aux extrémités COOH et NH2 terminales, parce que si on considère que la protéase à réussi à les cliver alors l'Ac ne pourra pas les reconnaitre et donc on n'auras pas de bandes, sauf que là on voit des bandes plus petites, ca vaut dire qu'il a eu un clivage partielle ? je ne comprend pas... Dans l'énoncé, on dit qu'on pend des cellules vivantes, est ce qu'on peut considérer que comme elles sont vivantes et que leur membranes n'ont pas été perméabilisées, alors les protéases n'ont pas pu pénétrer dans le cellule pour aller cliver les extrémités ? mais ca me perturbe pcq on voit des bandes plus petites alors je comprend pas ce qui ce passe exactement... je sais pas si je suis assez claire n'hésitez pas à me dire si vous ne comprenez pas mon problème https://www.zupimages.net/viewer.php?id=21/01/z8y4.png Edited January 8, 2021 by shasha99 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau PaupauDeFleur Posted January 8, 2021 Ancien du Bureau Share Posted January 8, 2021 Salut @shasha99! Dans cette expérience tu dois comprendre que la protéine de base fait 120 kDa, et celle ci est clivée via les proteases car il y a deux bandes sur la piste 3 de 60 et 40 KDA : cela montre que l’ac va reconnaître la partie Nter qui est un peptide de 60 kDa et un autre ça va reconnaître Cter qui est un peptide de 40 kDa si jamais il y a autre chose qui t’embête que je n’ai pas expliqué n’hésite pas ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière shasha99 Posted January 8, 2021 Author Ancien Responsable Matière Share Posted January 8, 2021 Salut @PaupauDeFleurmerci pour ta réponse ! mais du coup le fait d'avoir des bandes plus petites vaut simplement dire que la protéine est clivée mais que les extrémités sont conservées parce qu'on les voit avec les Ac ? et comme on les voit ca vaut dire qu'elles sont en intra cellulaire et donc protégée de la protéase ? genre si le domaine N ter était en extra cellulaire on ne l'aurait pas vu car il serait exposée à la protéase et donc dégradé ? comment on peut conclure au fait que les extrémités sont en intra ou en extra cellulaire ? dsl si je pose trop de question mais je me sens pas très à l'aise avec ce genre de qcm Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau Solution PaupauDeFleur Posted January 8, 2021 Ancien du Bureau Solution Share Posted January 8, 2021 Oui désolée je ne t’ai pas expliqué cette partie (j’avais un peu oublié la subtilité des proteases et des domaines intra/extra 🥲) ... du coup tu as raison vu que les domaines sont reconnus par les anticorps ils sont tout les deux intracellulaires et protégés des proteases, si une des deux extrémités était en extra il n’y aurait pas de reconnaissance sur le Wb puisque elle serait clivée par la protease et ne t’en fait pas j’ai eu du mal à assimiler ce genre de qcm moi aussi, (même actuellement je bug encore quand je regarde ce type d’exercice) bon courage !!! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière shasha99 Posted January 9, 2021 Author Ancien Responsable Matière Share Posted January 9, 2021 @PaupauDeFleur okk mercii bcp tu me sauves la vie !!! PaupauDeFleur 1 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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