inji_sadek52 Posted January 4, 2021 Posted January 4, 2021 bonsoir, Je ne comprend pas pourquoi dans le cours, plus précisément dans cette diapo la https://zupimages.net/viewer.php?id=21/01/ymwx.png on a la phrase : "On va couper pbglobine et pRH par BamH1" je comprend pourquoi on coupe la pBGLOBINE avec BAMH1 puisqu'on veut "isoler" l'ADNc codant la Bglobine mais pourquoi on coupe la pRH aussi par BamH1, dans quel but? Merci a vous et bonne soirée Quote
Croziflette_Claquette Posted January 4, 2021 Posted January 4, 2021 Salut! Après avoir coupé pBglobine par BamH1 le fragment de l'ADNc que tu obtiens aura des extrémités spécifiques de l'enzyme BamH1 et ne pourra se recoller avec un autre fragments qui a des extrémités BamH1 aussi. Donc ici si tu veux insérer l'ADNc que tu as coupé devant le promoteur eucaryote constitutif tu as le choix de 4 enzymes, mais seul BamH1 te permettra de l'insérer, avec les autres les extrémités ne seront pas compatibles et t'auras pas d'insertion. C'est bon pour toi? Quote
inji_sadek52 Posted January 4, 2021 Author Posted January 4, 2021 il y a 56 minutes, Croziflette_Claquette a dit : Salut! Après avoir coupé pBglobine par BamH1 le fragment de l'ADNc que tu obtiens aura des extrémités spécifiques de l'enzyme BamH1 et ne pourra se recoller avec un autre fragments qui a des extrémités BamH1 aussi. Donc ici si tu veux insérer l'ADNc que tu as coupé devant le promoteur eucaryote constitutif tu as le choix de 4 enzymes, mais seul BamH1 te permettra de l'insérer, avec les autres les extrémités ne seront pas compatibles et t'auras pas d'insertion. C'est bon pour toi? oui merci bcp!! Mais je ne comprend pas le terme promoteur eucaryote constitutif, ca veut dire quoi exactement dans ce contexte? Croziflette_Claquette 1 Quote
Solution Croziflette_Claquette Posted January 4, 2021 Solution Posted January 4, 2021 à l’instant, inji_sadek52 a dit : oui merci bcp!! Mais je ne comprend pas le terme promoteur eucaryote constitutif, ca veut dire quoi exactement dans ce contexte? Promoteur = séquence qui permet la transcription, obligatoire Eucaryote = si tu utilises ce promoteur dans un procaryote rien ne se passera Constitutif = ici ça veut dire que c'est un promoteur qui s'exprimera tous le temps dans toutes les cellules. Donc quand tu mettras le vecteur dans une cellule il marchera automatiquement. C'est à l'inverse d'un promoteur temps-specifique (qui s'exprime à certains moments) ou tissus-spécifique (qui s'exprime que dans certaines cellules spécifiquement). En fait c'est un promoteur universel chez les eucaryotes inji_sadek52 1 Quote
inji_sadek52 Posted January 4, 2021 Author Posted January 4, 2021 il y a 2 minutes, Croziflette_Claquette a dit : Promoteur = séquence qui permet la transcription, obligatoire Eucaryote = si tu utilises ce promoteur dans un procaryote rien ne se passera Constitutif = ici ça veut dire que c'est un promoteur qui s'exprimera tous le temps dans toutes les cellules. Donc quand tu mettras le vecteur dans une cellule il marchera automatiquement. C'est à l'inverse d'un promoteur temps-specifique (qui s'exprime à certains moments) ou tissus-spécifique (qui s'exprime que dans certaines cellules spécifiquement). En fait c'est un promoteur universel chez les eucaryotes ah merci bcp!! Je comprend mieux ! Croziflette_Claquette 1 Quote
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