cassolnousmanque Posted January 4, 2021 Posted January 4, 2021 (edited) coucou tout le monde j'ai deux petites questions est ce que on peut dire que BamH1 est une endonucléase (il me semble que oui mais ce n'est pas écrit explicitement ) et aussi si on a un gene d'intérêt qu'on veut cloner, du coup on a dit qu'on le coupait grâce à des enzymes (d'où ma question sur les endonucléases) et après on va l'insérer dans le vecteur mais du coup si les enzymes qu'on veut utiliser coupent à l'intérieur du gene on peut pas cloner le gene qui nous intéresse non ? ou alors faut trouver d'autres enzymes ? désolé c'est pas hyper clair mais ça l'est pas plus dans ma tête Edited January 4, 2021 by OphelieS Quote
lanoradrenaline_auski Posted January 4, 2021 Posted January 4, 2021 il y a 26 minutes, OphelieS a dit : coucou tout le monde j'ai deux petites questions est ce que on peut dire que BamH1 est une endonucléase (il me semble que oui mais ce n'est pas écrit explicitement ) et aussi si on a un gene d'intérêt qu'on veut cloner, du coup on a dit qu'on le coupait grâce à des enzymes (d'où ma question sur les endonucléases) et après on va l'insérer dans le vecteur mais du coup si les enzymes qu'on veut utiliser coupent à l'intérieur du gene on peut pas cloner le gene qui nous intéresse non ? ou alors faut trouver d'autres enzymes ? désolé c'est pas hyper clair mais ça l'est pas plus dans ma tête Coucou je peux te confirmer que la BamH1 est bien une endonucelase.. Par contre je suis pas sur d'avoir compris ta deuxième question donc je vais essayer de repondre et tu me dis si c'est cette réponse que t'attendais sinon je laisse la place à quelqu'un d'autre . Normalement on aura pas besoin de d'autres enzymes , car ton BamH1 ( qui est bien une endonucelase ) vas te permettre de isolée ta partie qui t'intéresse ( ici sur le schéma c'était par exemple l'ADNc codant pour la beta globine. Tu pourra l'isoler et puis le cloner grâce a une molécule de vecteur comment tu l'as dis . à verifier si un RM passe par la Tu me dis si ca t'aide . bonne soirée Quote
cassolnousmanque Posted January 4, 2021 Author Posted January 4, 2021 (edited) il y a 14 minutes, lanoradrenaline a dit : Coucou je peux te confirmer que la BamH1 est bien une endonucelase.. Par contre je suis pas sur d'avoir compris ta deuxième question donc je vais essayer de repondre et tu me dis si c'est cette réponse que t'attendais sinon je laisse la place à quelqu'un d'autre . Normalement on aura pas besoin de d'autres enzymes , car ton BamH1 ( qui est bien une endonucelase ) vas te permettre de isolée ta partie qui t'intéresse ( ici sur le schéma c'était par exemple l'ADNc codant pour la beta globine. Tu pourra l'isoler et puis le cloner grâce a une molécule de vecteur comment tu l'as dis . à verifier si un RM passe par la Tu me dis si ca t'aide . bonne soirée alors ça oui j'avais compris (mais merci pour le rappel c'est jamais de trop !) mais du coup dans ce cas là oui ça fonctionnait mais du coup ma question c'est imaginons que BamH1 coupe à 3600 pb et à 4100 pb (en gros à la place de EcoR1) du coup si on l'utilisait, l'endonucléase couperait le gène qu'on veut cloner à peu près au milieu (donc on n'aurait pas toute l'information en gros) du coup je voulais savoir si dans ce cas là on pouvait pas utiliser cette enzyme et que du coup on devait en trouver une autre qui coupe aux extrémités du gene à étudier dis moi si c'est plus clair ou pas Edited January 4, 2021 by OphelieS Quote
Solution Croziflette_Claquette Posted January 4, 2021 Solution Posted January 4, 2021 Salut @OphelieS, je confirme ce qui a été dit et effectivement aussi si l'enzyme que tu utilises coupe en plein milieu de la séquence, il ne faut pas l'utiliser! Tu as besoin de la séquence entière (normalement) pour faire ta protéine donc il te faudra en trouver une autre cassolnousmanque 1 Quote
cassolnousmanque Posted January 4, 2021 Author Posted January 4, 2021 il y a 14 minutes, Croziflette_Claquette a dit : Salut @OphelieS, je confirme ce qui a été dit et effectivement aussi si l'enzyme que tu utilises coupe en plein milieu de la séquence, il ne faut pas l'utiliser! Tu as besoin de la séquence entière (normalement) pour faire ta protéine donc il te faudra en trouver une autre ok super merci beaucoup Croziflette_Claquette 1 Quote
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