PCR maraicher

[GrandPéric]

Bonjouuur, 

J'ai du mal à comprendre comment résoudre l'exo, je crois que je m'emmêle avec toutes les infos, quelqu'un peut-il m'aider ? (VRAI : AD)

Merciiii et bon réveillon 

Edited December 31, 2020 by GrandPéric

[YEAHBOY]

Il suffit de bien lire l'énoncé : les amorces CD sont spécifiques de l'allèle normal : elle ne s'hybride uniquement lorsque tu as l'allèle normal

                                                 -> si tu as un amplicon à 150pb avec CD ça veut dire que tu as un allèle normal présent 

 

                                                 les amorces ED sont spécifiques de l'allèle mutée : elle ne s'hybride uniquement lorsque tu as l'allèle mutée

                                                 -> si tu as un amplicon à 150pb avec ED ça veut dire que tu as un allèle normal présent 

 

La bande à 250pb est un contrôle : s'il y a une bande à 250pb, l'absence d'une bande à 150pb n'est pas liée à une erreur de manip : la PCR a bien eu lieu donc si tu n'as pas de bande à 150pb quand le contrôle est positif c'est que l'allèle concerné n'est pas présent

 

Quand tu fais la synthèse de tout ça tu peux en conclure que : 

 

Normal = homozygote normal

Patient 1 = hétérozygote 

Patient 2 = homozygote muté

Patient 3 = homozygote normal

 

Pour la a) ce n'est pas gênant les amorces n'ont pas de sites d'hybridation identiques ou on aurait pu avoir une compétition : certes C et E se fixent au même endroit mais on dit bien qu'elles sont spé soit de l'allèle normal ou muté.

 

Pour la c) il peut avoir une mutation en dehors de la zone amplifié donc faux

 

Pour la e) s'il était hétérozygote pour une mutation ponctuelle dans la zone d'hybridation de A on aurait que la moitié de ses allèles qui pourrait donner un amplicon (l'autre moitié étant mutée l'amorce ne s'hybride pas), donc la largeur de bande de 250pb serait moins importante que chez les autres patients : ce n'est pas le cas donc faux

 

                                                

[GrandPéric]

il y a 5 minutes, YEAHBOII a dit :

Il suffit de bien lire l'énoncé : les amorces CD sont spécifiques de l'allèle normal : elle ne s'hybride uniquement lorsque tu as l'allèle normal

                                                 -> si tu as un amplicon à 150pb avec CD ça veut dire que tu as un allèle normal présent 

 

                                                 les amorces ED sont spécifiques de l'allèle mutée : elle ne s'hybride uniquement lorsque tu as l'allèle mutée

                                                 -> si tu as un amplicon à 150pb avec ED ça veut dire que tu as un allèle normal présent 

 

La bande à 250pb est un contrôle : s'il y a une bande à 250pb, l'absence d'une bande à 150pb n'est pas liée à une erreur de manip : la PCR a bien eu lieu donc si tu n'as pas de bande à 150pb quand le contrôle est positif c'est que l'allèle concerné n'est pas présent

 

Quand tu fais la synthèse de tout ça tu peux en conclure que : 

 

Normal = homozygote normal

Patient 1 = hétérozygote 

Patient 2 = homozygote muté

Patient 3 = homozygote normal

 

Pour la a) ce n'est pas gênant les amorces n'ont pas de sites d'hybridation identiques ou on aurait pu avoir une compétition : certes C et E se fixent au même endroit mais on dit bien qu'elles sont spé soit de l'allèle normal ou muté.

 

Pour la c) il peut avoir une mutation en dehors de la zone amplifié donc faux

 

Pour la e) s'il était hétérozygote pour une mutation ponctuelle dans la zone d'hybridation de A on aurait que la moitié de ses allèles qui pourrait donner un amplicon (l'autre moitié étant mutée l'amorce ne s'hybride pas), donc la largeur de bande de 250pb serait moins importante que chez les autres patients : ce n'est pas le cas donc faux

 

                                                

WHAAA merci pour cette superbe explication, effectivement j'ai lu beauuucoup trop vite, merciiiii !!