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Northern blot


C31
Go to solution Solved by YEAHBOY,

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  • Solution

Quand on fait un nothern ou un southern on utilise une sonde marquée pour révéler la molécule à laquelle elle s'est hybridée (ici des acides nucléiques)

 

En nothern la sonde s'hybride avec les ARN cibles présents dans la cellule. 

 

NB : le couple sonde/ARN hybridé migre dans le gel au niveau correspondant à la taille de l'ARN 

        Si ton ARN fait 10 000 bases mais que la sonde se fixe sur une zone de 100 bases dans cet ARN, tu verras une bande à 10 000 car c'est la totalité de l'ARN qui migre

 

En nothern la sonde peut s'hybrider avec les différents intermédiaires de maturation : les ARN qui ont encore les introns non épissés, ceux qui n'ont pas la queue poly A etc...

Mais de toute façon le plus petit ARN normalement c'est l'ARN mature de 10 000 bases

 

Les 2750 bases dans cet ARN correspondent à la partie codante de de cet ARN mais quand la sonde se fixe sur l'ARN mature, c'est l'ensemble de l'ARN qui migre pas uniquement sa partie codante (ça sous entendrait que les parties non codantes ont été excisé)

 

Tu t'attends donc à voir une bande à 10 000pb (qui contient les 2751pb codantes), et des bandes un peu plus grandes correspondants aux formes non matures

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