R0SE Posted March 4, 2015 Share Posted March 4, 2015 Bonjour, je ne comprends pas le principe des animaux Knock out dans la transgenese homologue, en quoi c'est différents d'animaux dont certains genes sont remplacés par les homologues humains ?? Egalement quand on parle de souris chimere, c'est que pas toutes les cellules possede le transgenes, mais Mme Couderc avait bien insisté que par transgenese toutes les cellules ont le transgene ! Merci d''avance pour vos réponses ! Bonne soirée Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Leomektoub Posted March 4, 2015 Solution Share Posted March 4, 2015 Salut ! Pour les souris chimères : transgenese additive c'est ajout du vecteur dans l'ovocyte avant la fusion des deux pronuclei donc une souris complètement transgénique. transgenese par recombinaison homologue c'est introduction du vecteur dans quelques cellules du blastocySte (cellules pluripotentes) donc dans ce cas certains blastomères sont gentiquement mofifiés d'autres non et on obtient une souris chimérique. Mais je suis d'accord avec toi aux toutes premières diapos elle a expliqué que transfert de gène c'est modif de cellules et transgenese modif de tout l'organisme y compris les cellules sexuelles... Les Animaux knock-out c'est juste qu'on va remplacer le gène par un gène qui ne sert à rien et qui sera invalide si il est exprimé. Si il est remplacé par un gène humain, là il y aura un effet genre une expression d'une protéine différente. Mais le KO c'est juste désactiver le gène. Link to comment Share on other sites More sharing options...
R0SE Posted March 9, 2015 Author Share Posted March 9, 2015 Salut Merci Leomektoub pour ta réponse ! je me pose une petite question aussi : est ce que quand on fait la transgenese on insert le vecteur ou on ne s'en sert que pour l'amplification ? parceque y'a marqué adn purifié par pcr ... ? MERCI Link to comment Share on other sites More sharing options...
Leomektoub Posted March 12, 2015 Share Posted March 12, 2015 Avec plaisir, En fait on purifie par PCR par ce qu'après insertion du vecteur il y a encore de l'ADN qui ne l'a pas intégré. Donc on fait une PCR qui sélectionne en amplifiant uniquement l'ADN modifié. Le résultat de la PCR c'est : l'ADN amplifié donc qui porte le vecteur l'ADN non amplifié qui est sans interêt Donc l'amplification c'est une étape de sélection de la transgenese. Link to comment Share on other sites More sharing options...
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