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QCM 12 Maraîchers 2020


Athénaïs
Go to solution Solved by yeehaw,

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  • Solution

salut @Athénaïs ! 

Alors, on va commencer par définir les marqueurs :

  • l'Annexine-V/FITC permet de marquer les PS.
  • L'iodure de propidium est un agent intercalant de l'ADN et donc va marquer l'ADN des cellules qui ont perdu leur intégrité membranaire (sinon, l'iodure de propidium ne peut pas franchir la membrane sauf si on perméabilise). 

dans la suite de l'explication, je vais juste dire "annexine" pour aller plus vite mais je parle bien de l'annexineV/FITC. 

 

Donc comme tu peux le deviner, dans cet exercice :

  • une cellule qui est marqué par l'iodure de propidium sera un cellule nécrotique (puisque perte de l'intégrité membranaire). 
  • Une cellule qui sera marqué seulement par l'Annexine sera apoptotique : car l'annexine a reconnu les PS externalisés et l'iodure de propidium n'a pas pu rentrer dans la cellule pour marquer l'ADN puisqu'une cellule apoptotique n'a pas perdu son intégrité membranaire. 
  • Mais, petite subtilité 🙂 Une cellule nécrotique peut aussi être marquée par l'annexine ! en effet, puisque la membrane est rompue, l'annexine va pouvoir rentrer et marquer les PS qui sont du coté intracellulaire. Pour que l'annexine marque une cellule nécrotique, il faut que la membrane soit suffisamment bien rompue : c'est pour ça que toutes les cellules nécrotiques ne seront pas marquées par l'annexine (ça dépend d'à quel point leur membrane est abimée en gros).

Donc si on résume :

  • Une cellule apoptotique est marquée seulement par l'annexine.
  • une cellule nécrotique est marquée soit seulement par l'iodure de propidium soit par l'annexine + l'iodure de propidium.

 

Maintenant on passe à la lecture du graphique : on est ici dans une cyrtométrie en flux. Chaque point que tu peux voir sur le schéma correspond à une cellule. Tu vois que graphique est coupé en 4 cadrans par de 2 lignes. Ces lignes sont des seuils de détection. Au dessus de la ligne horizontale, ce sont les cellules qui sont marquées significativement par l'iodure de propidium. A droite de la ligne verticale, ce sont les cellules marquées significativement par l'AnnexineV/FITC. Donc, on peut en déduire que :

  • dans le cadran en bas à gauche : les cellules ne sont ni marquées par l'annexine, ni par l'iodure de propidium. Ce sont les cellules saines. 
  • Dans le cadran en haut à gauche : ce sont les cellules qui sont marquées seulement par l'iodure de propidium : ce sont des cellules nécrotiques
  • Dans le cadran en haut à droite : ce sont les cellules "iodure de propidium +" et "annexine +" (positives aux 2). Ce sont aussi des cellules nécrotiques
  • Dans le cadran en bas à droite : iodure de propidum (-) et annexine (+) donc ce sont les cellules apoptotiques

 

Voila, tu sais tout maintenant et tu peux résoudre n'importe quelle expérience similaire ! 

Bon courage et force à toi 🙂 💚

 

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