Alvina Posted October 17, 2013 Share Posted October 17, 2013 Bonsoir ! Quelqu'un pourrait -il m'expliquer les principes de la chromatographie d'échange de cations et de la chromatographie de partage s'il vous plait ? Merci d'avance Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Guest Jeffrey Posted October 17, 2013 Solution Share Posted October 17, 2013 Bonsoir :-) On va commencer par la chromatographie d'échange de cations : c'est une méthode qui va te permettre d'éluer des AA en fonction de leur pHi. Tu as une colonne avec des microbilles chargés négativement. Tu déposes ton mélange d'acides aminés a pH très faible de façon a ce que tous ces acides aminés soient chargés positivement et se comportent comme des cations. Dans ces conditions, tous vont se fixer sur la colonne chargée négativement. Puis progressivement, tu vas augmenter ton pH. A chaque fois que le pH atteint le pHi d'un acide aminé, il se retrouve sous forme zwitterionique (c'est a dire que le bilan de charge net est égal a 0), et donc il se détache de la colonne. Tu vas donc pouvoir éluer en premier les acides aminés a faibles pHi (les AA dicarboxyliques), et en dernier les acides aminés a forts pHi (les AA basiques). Si tu as compris comment cela fonctionne, alors tu peux déduire comment fonctionne une chromatographie d'échange d'anions cette fois ci (ça fonctionne en sens inverse en fait, avec une colonne chargée positivement et avec un dépôt a pH élevé). Pour la chromatographie d'affinité : c'est une méthode qui permet de séparer les AA selon leur caractère hydrophile / hydrophobe. Tu déposes tes AA sur un support polaire (cellulose) et par capillarité, un solvant apolaire (eau+alcools) va faire migrer les AA d'autant plus loin qu'ils sont hydrophobes. Les AA qui ont peu migré sont donc les plus hydrophiles (AA ionisés, AA hydroxylés) et les AA qui ont migré loin sont très hydrophobes (AA aliphatiques ramifies ou AA aromatiques). Ça te paraît plus clair ? Link to comment Share on other sites More sharing options...
Alvina Posted October 18, 2013 Author Share Posted October 18, 2013 Oui, parfait ! Merci beaucoup Link to comment Share on other sites More sharing options...
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