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QCM techniques: PCR


Leomektoub
Go to solution Solved by denis-simon,

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Bonjour !

 

QCM 17: Chez les sujets sains, l’exon 4 d’un gène contient 250pb (il n’y a pas de site pour l’endonucléase HindIII). Cet exon peut être spécifiquement amplifié par la PCR en utilisant un couple d’amorces s’hybridant au niveau des extrémités de cet exon. Une mutation ponctuelle dans cet exon introduit un site pour l’enzyme HindIII. Une électrophorèse est réalisée après PCR de cette région génique sur l’ADN de plusieurs sujets puis incubation avec HindIII (dans des conditions de digestion complète). Après coloration au bromure d’éthidium, on obtient l’image suivante :

 
Les résultats obtenus par cette méthode peuvent s’interpréter ainsi :

A. Le sujet 2 possède 2 copies strictement identiques de l’exon 4.
B. Le sujet 1 est hétérozygote pour la mutation introduisant le site Hind III.
C. Aucun allèle du sujet 2 ne présente de mutation introduisant le site HindII.
D. Le sujet 3 est probablement homozygote pour la mutation introduisant le site HindII.
E. Il semble qu'au moins un des allèles de chaque sujet analysé porte un exon 4 de taille normale. 

 

C'est corrigé BCDE

La correction du A :A. La présence de mutations en dehors de l’exon étudié est fort possible.  Sauf qu'on parle de l'exon 4 uniquement non ?

Le C me parait faux car il pourrait y avoir la mutation sur un autre allèle du sujet 2.

La E, est ce que c'est par ce que l'exon ne change jamais de taille meme si il y a mutation ?

 

Un autre item que je ne comprend pas 

QCM 22 : RT-PCR :

B. Nécessite une étape de reverse transcription. 

Faux car :B. Reverse transcription de l'ARN en ADN et pas l'inverse. 

Donc est ce que transcriptase inverse et reverse transcription sont différentes ? 

 

Merci de vos réponses !

 

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  • Solution

on parle d'une mutation possible dans l'exon 4 en dehors de ces extremité (ayant aucune influence dans l'elongation par pcr au milieu par exemple)

 

pour la 22 j'aurai pensé comme toi (quelle est l'origine de la question tat ou annale?)

la transcriptase inverse et l'enzyme qui permet la reverse transcription

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Donc la mutation se trouve dans l'exon 4 et on voit que le patient 1 présente plusieurs tailles d'AN donc il est n'est pas homozygote et l'item A est faux (si j'ai compris)

Ok parfait pour la reverse transcriptase, c'était un item du poly du tat 2014-15.

Merci de ta réponse rapide

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