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Western blot MEMBRANE PLASMIQUE


VALD
Go to solution Solved by Barnabee,

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salut salut, 

petite question concernant la révélation en western blot dans le cours sur la membrane plasmique: est-ce que les 3 "étapes" à savoir (AC I, AC II+ substrat chimilumisnescence, film photo) sont nécessaires dans TOUS les cas ? Ou est ce que on peut seulement utiliser un AC I pour révéler? 

 

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Salut ! J'ai pas le contexte du western blot de ton cours, mais en théorie 1 AC sert à révéler 1 protéine, donc c'est à toi de voir comment tu t'organises et combien tu veux en mettre ! L'important c'est de comprendre à quoi chaque anticorps sert

 

Si t'as besoin de plus de précisions sur le western blot dont tu parles, est-ce que tu peux le mettre en photo ici stp ? 

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  • Solution

Ok je pensais que c'était un western blot en particulier !

 

En gros tu vois que le premier anticorps réagit avec une protéine, le deuxième avec une autre protéine

On a pas trop vu ça en détail en cours, mais à mon avis la chimiluminescence c'est pour révéler tes anticorps ! (on leur colle un réactif dessus pour qu'ils apparaissent fluo, et on voit où ils se sont mis, et donc la masse de la protéine)

 

Donc oui c'est un schéma général du western blot mais sache que tu peux utiliser d'autres techniques ! avec plus ou moins d'anticorps, et d'autres techniques de révélations (par exemple un colorant qui fera une tache sur ta bande de nitrocellulose)

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