DrR Posted May 31, 2020 Posted May 31, 2020 reee https://tutoweb.org/tat_librairie/Rangueil/Annales de Concours/2012-2013/Rangueil S2 Mai 2013 - SUJETS.pdf 3 C vrai: j'ai pas compris, comment on sait que l'ac4 reconnait la forme soluble dans l'extrait protéique ? 4B ; pourquoi il est vrai alors que l'ac1 reconnait aussi une bande à 40k alors qu'on veux spécifiquement évaluer la bande a 75k 11 D : pourquoi pas 25 pourcent ? en regle générale c'est pas 50% getero , 25 % homo ++ et 25% homo -- ? en plus sur environ 100 embryons à J8 y a 24 embryons -- merci beaucoup par avance Quote
Solution Metallica Posted May 31, 2020 Solution Posted May 31, 2020 Et re Il y a 1 heure, DrR a dit : 3 C vrai: j'ai pas compris, comment on sait que l'ac4 reconnait la forme soluble dans l'extrait protéique ? Car tu sais grâce aux immunotransfert et ip que l'Ac IV reconnait un épi conformationnel donc forcément au moment ou il a été purifié en chromato d'affinité, il a fallu que l'épitope soit accessible ça c'est pour la partie sur le polystyrène et pour la partie sur le "soluble" ça se réfère juste à la conformation native de la prot (sans dénaturation) et du coup c'est bien le cas vu que l'on a un signal associé en ip pour cet Ac IV Il y a 2 heures, DrR a dit : 4B ; pourquoi il est vrai alors que l'ac1 reconnait aussi une bande à 40k alors qu'on veux spécifiquement évaluer la bande a 75k C'est vrai parce qu'on cherche à faire une évaluation semi-quantitative en immunotransfert c'est-à-dire une évaluation basée sur l'épaisseur des bandes produites. Même si l'Ac 1 reconnait aussi une prot à 40kDa, la bande associée à celle ci sera séparée de celle de l'AgM donc ça ne perturbera pas l'étude (par contre ça ne serait pas possible en dot-blot car pas de migration donc pas de séparation des Ag reconnus) :)) Il y a 2 heures, DrR a dit : 1 D : pourquoi pas 25 pourcent ? en regle générale c'est pas 50% getero , 25 % homo ++ et 25% homo -- ? en plus sur environ 100 embryons à J8 y a 24 embryons -- Ouaip tu as raison sur le principe et il y a bien 24/100 embryons de 8 jours sauf que l'item parle de nouveau-né et non pas d'embryon..tu peux voir dans le tableau , qu'à partir du 12ème jour, il n'y a plus d'embryons viables donc forcément on obtiendra 0 nouveaux-nés CytC -/- Quote
DrR Posted May 31, 2020 Author Posted May 31, 2020 il y a une heure, Metallica a dit : Et re Car tu sais grâce aux immunotransfert et ip que l'Ac IV reconnait un épi conformationnel donc forcément au moment ou il a été purifié en chromato d'affinité, il a fallu que l'épitope soit accessible ça c'est pour la partie sur le polystyrène et pour la partie sur le "soluble" ça se réfère juste à la conformation native de la prot (sans dénaturation) et du coup c'est bien le cas vu que l'on a un signal associé en ip pour cet Ac IV C'est vrai parce qu'on cherche à faire une évaluation semi-quantitative en immunotransfert c'est-à-dire une évaluation basée sur l'épaisseur des bandes produites. Même si l'Ac 1 reconnait aussi une prot à 40kDa, la bande associée à celle ci sera séparée de celle de l'AgM donc ça ne perturbera pas l'étude (par contre ça ne serait pas possible en dot-blot car pas de migration donc pas de séparation des Ag reconnus) :)) Ouaip tu as raison sur le principe et il y a bien 24/100 embryons de 8 jours sauf que l'item parle de nouveau-né et non pas d'embryon..tu peux voir dans le tableau , qu'à partir du 12ème jour, il n'y a plus d'embryons viables donc forcément on obtiendra 0 nouveaux-nés CytC -/- wow parfait merci beaucoup! ça fait du bien de comprendre Quote
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