lauu Posted May 30, 2020 Posted May 30, 2020 Saluut, j'ai qq questions (enfin plutôt beaucoup oups) sur ce poly dans les qcm en vrac - QCM 11: A. Un vecteur doit contenir un promoteur adapté à l'organisme utilisé pour la réplication. --> VRAI je comprend pas trop pourquoi c'est vrai étant donné qu'on peut avoir un promoteur eucaryote et faire la réplication dans une bactérie non?? -QCM 12 les enzymes de restriction doivent avoir une activité polymérase et exonucléase je pensais que l'enzyme de restriction était une endonucléase et ça c'étaient les enzymes de modification non? -QCM 19 E. Après leur utilisation il n'est pas nécessaire d'incuber les enzymes de modification. --> FAUX on a parlé qu'elles devaient être incubées apres leur utilisation? -QCM 33 D. Les anticorps utilisés en Dot-Blot permettent une détection directe ou indirecte. --> VRAI j'étais pas trop sure parce qu'en immuno y a marqué indirect, on peut faire les deux du coup? (mais la c'était dans la partie sur les protéines toute manière) -QCM 43 B. EcoRV est une enzyme à bouts francs. C. EcoR1 est une enzyme à bouts francs. c'est à savoir? -QCM 77 A. Il est possible de concentrer des Ig avec des cycles de précipitations/ renaturation on en a parlé? -QCM 80 E. Si la protéines existes sous la forme de monomère et de dimère la chromatographie d'affinité permettra de les séparer. --> FAUX ils mettent en correction que c'est la chromatographie d'exclusion mais c'est qd meme pas possible de savoir avec la chromatographie d'affinité? désolé pour toutes ces question et merci d'avance à celui qui répondra Quote
Solution enerys4 Posted June 1, 2020 Solution Posted June 1, 2020 Coucou! Je vais répondre à tout ça! Ne t'en fais pas pour la quantité de questions, on est pour répondre à tout On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 11: A. Un vecteur doit contenir un promoteur adapté à l'organisme utilisé pour la réplication. --> VRAI je comprend pas trop pourquoi c'est vrai étant donné qu'on peut avoir un promoteur eucaryote et faire la réplication dans une bactérie non?? Expand Alors, je ne suis pas trop trop sûre d'avoir compris ton raisonnement. Mais en gros, pour répliquer un organisme dans une bactérie, il faut à tout prix que le vecteur possède un promoteur procaryote. Une bactérie ne peut pas prendre en charge un promoteur eucaryote. Et c'est pareil pour une cellule eucaryote (elle ne peut pas prendre en charge un promoteur procaryote). Donc c'est normal que ce QCM soit vrai. On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 12 les enzymes de restriction doivent avoir une activité polymérase et exonucléase je pensais que l'enzyme de restriction était une endonucléase et ça c'étaient les enzymes de modification non? Expand Dans le cours de Mme Couderc, il y a bien écrit que ce sont les enzymes de modifications qui ont une activité polymérase et exonucléase. Donc tu as raison! C'est une errata si ce QCM est compté faux. On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 19 E. Après leur utilisation il n'est pas nécessaire d'incuber les enzymes de modification. --> FAUX on a parlé qu'elles devaient être incubées apres leur utilisation? Expand Non, je ne pense pas que vous l'ayez vu cette année. Je pense que tu peux oublier cet item. On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 33 D. Les anticorps utilisés en Dot-Blot permettent une détection directe ou indirecte. --> VRAI j'étais pas trop sure parce qu'en immuno y a marqué indirect, on peut faire les deux du coup? (mais la c'était dans la partie sur les protéines toute manière) Expand En effet, dans le cours de Monsieur Segui, il y a écrit que la détection se fait par marquage indirecte. Donc reste avec l'idée que c'est un marquage indirecte (pour le dot blot et le western blot du coup). On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 43 B. EcoRV est une enzyme à bouts francs. C. EcoR1 est une enzyme à bouts francs. c'est à savoir? Expand Non, Mme Couderc ne vous posera jamais une question comme ça. On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 77 A. Il est possible de concentrer des Ig avec des cycles de précipitations/ renaturation on en a parlé? Expand Je ne pense pas que vous l'ayez vu. Je veux bien une confirmation de quelqu'un qui était en amphi. Mais ça ne me dit rien du tout. @Sashounet, vous l'avez vu? On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 80 E. Si la protéines existes sous la forme de monomère et de dimère la chromatographie d'affinité permettra de les séparer. --> FAUX ils mettent en correction que c'est la chromatographie d'exclusion mais c'est qd meme pas possible de savoir avec la chromatographie d'affinité? Expand En effet, seule la chromato d'exclusion le peut. Imagine tu veux séparer deux formes (monomère et dimère) d'une protéine. Si tu tentes de les séparer avec une chromato d'affinité, la chromato va retenir les deux formes de la protéine de manière identique. Donc la séparation des deux formes est impossible. Maintenant, si tu utilises une chromato d'exclusion, la forme dimère (plus lourde) va tomber plus rapidement. Tu vas donc pouvoir récupérer d'abord la forme dimère puis la forme monomère. Mes réponses te conviennent-elles? Quote
Sashounet Posted June 1, 2020 Posted June 1, 2020 On 6/1/2020 at 1:21 PM, enerys4 said: @Sashounet, vous l'avez vu? Expand Non je crois pas.. Quote
lauu Posted June 1, 2020 Author Posted June 1, 2020 super, merci pour tes réponses!! du coup pour le promoteur On 6/1/2020 at 1:21 PM, enerys4 said: Mais en gros, pour répliquer un organisme dans une bactérie, il faut à tout prix que le vecteur possède un promoteur procaryote. Une bactérie ne peut pas prendre en charge un promoteur eucaryote. Et c'est pareil pour une cellule eucaryote (elle ne peut pas prendre en charge un promoteur procaryote). Expand sur ce vecteur (juste pour illustrer): L'ADNc pMV est sous la dépendance d'un promoteur eucaryote mais cela n'empêche pas que le vecteur se réplique chez un procaryote, pour ça c'est l'ORI qui est nécessaire non? fin pour moi le promoteur va servir ensuite pour la transcription et ainsi permettre de faire exprimer le gène, mais pour le répliquer je ne vois pas pourquoi il faut un promoteur spécifique de l'organisme a chaque fois on a un ADNc sous la dépendance d'un promoteur eucaryote mais pourtant pour le répliquer on utilise avant une bactérie soit procaryote, ou alors j'ai rien compris... encore merci et j'espère que j'ai pas raconté trop n'importe quoi Quote
enerys4 Posted June 2, 2020 Posted June 2, 2020 Ah oui en effet! Je pense juste avoir lu trop vite ta question ^^ Mais tu as tout à fait raison! On 6/1/2020 at 7:00 PM, lauu said: L'ADNc pMV est sous la dépendance d'un promoteur eucaryote mais cela n'empêche pas que le vecteur se réplique chez un procaryote, pour ça c'est l'ORI qui est nécessaire non? fin pour moi le promoteur va servir ensuite pour la transcription et ainsi permettre de faire exprimer le gène, mais pour le répliquer je ne vois pas pourquoi il faut un promoteur spécifique de l'organisme a chaque fois on a un ADNc sous la dépendance d'un promoteur eucaryote mais pourtant pour le répliquer on utilise avant une bactérie soit procaryote, ou alors j'ai rien compris... Expand Mais sache que, tout ce que tu as dit là est tout à fait correct! En gros, le promoteur eucaryote ici sert juste à transcrire pMV. ORI est totalement indépendant de ce promoteur. ORI c'est l'origine de réplication qui permet la réplication de ce vecteur dans les bactéries. On 5/30/2020 at 7:11 PM, lauu said: QCM 11: A. Un vecteur doit contenir un promoteur adapté à l'organisme utilisé pour la réplication. --> VRAI je comprend pas trop pourquoi c'est vrai étant donné qu'on peut avoir un promoteur eucaryote et faire la réplication dans une bactérie non?? Expand Du coup, concernant cet item, je ne sais pas trop quoi te dire. Il est sûrement mal formulé. Mais tu as compris comment ça marche alors ne t'attarde pas trop dessus. Quote
lauu Posted June 2, 2020 Author Posted June 2, 2020 d’accord merci beaucoup pour ton aide! @enerys4 Quote
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