LeBlaireau Posted May 30, 2020 Share Posted May 30, 2020 (edited) Bonjour! Quand on fait une cytométrie en flux pour quantifier la sécrétion de cytokines, j'ai du mal à comprendre pourquoi on a besoin d'un Ac de capture ET d'un Ac de détection, chacun couplés à un fluorochrome different. On a eu un qcm comme ça au ccb n°2 de maraichers. Pourquoi un seul Ac ne suffit pas? Et du coup, est ce que les deux Ac ont le même paratope (spécifique de la cytokines)? Edited May 31, 2020 by LeBlaireau Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
LeBlaireau Posted May 31, 2020 Author Share Posted May 31, 2020 @nour8 @TontonChène ? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau Solution windu Posted May 31, 2020 Ancien du Bureau Solution Share Posted May 31, 2020 Il y a 23 heures, LeBlaireau a dit : Quand on fait une cytométrie en flux pour quantifier la sécrétion de cytokines, j'ai du mal à comprendre pourquoi on a besoin d'un Ac de capture ET d'un Ac de détection, chacun couplés à un fluorochrome different. Salut ! En fait, ton premier AC1 est de capture comme t'as dit, donc il va se lier à la cytokine. Puisque tu cherches à quantifier les cytokines, elles doivent être le facteur limitant, donc tu mets des AC en excès. Du coup, tu ne peux pas t'arrêter là parce que tous tes AC1 ne vont pas se lier à tes cytokines, certains seront "libres", donc une fluorescence ne correspondra pas toujours à une cytokine. Tu vas donc rajouter un deuxième AC2, de détection, aussi en excès, qui va se lier au complexe cytokine-AC1. C'est la somme des fluorescences qui pourra alors t'indiquer la présence de cytokines. Pour faire un exemple, imaginons que AC1 et AC2 aient des fluorescences respectives dans le rouge et le vert. Là où tu n'as que du rouge, ce sont les AC1 en excès. Là où tu n'as que du vert, ce sont les AC2 en excès. Là où tu as du jaune (rouge + vert) tu auras des cytokines donc tu pourras évaluer leur quantité en fonction de l'intensité de la fluorescence (jaune). Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
LeBlaireau Posted May 31, 2020 Author Share Posted May 31, 2020 D'accord merci beaucoupp @windu Du coup l'Ac 2 va se lier à la cytokine aussi ou au fragment Fc de l'Ac 1? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau windu Posted May 31, 2020 Ancien du Bureau Share Posted May 31, 2020 à l’instant, LeBlaireau a dit : D'accord merci beaucoupp @windu Du coup l'Ac 2 va se lier à la cytokine aussi ou au fragment Fc de l'Ac 1? Avec plaisir, et le deuxième AC va se lier à la cytokine aussi (ou au complexe cytokine-AC1) mais pas à l'AC1 seul, sinon il serait inutile ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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