LeBlaireau Posted May 30, 2020 Posted May 30, 2020 (edited) Bonjour! Quand on fait une cytométrie en flux pour quantifier la sécrétion de cytokines, j'ai du mal à comprendre pourquoi on a besoin d'un Ac de capture ET d'un Ac de détection, chacun couplés à un fluorochrome different. On a eu un qcm comme ça au ccb n°2 de maraichers. Pourquoi un seul Ac ne suffit pas? Et du coup, est ce que les deux Ac ont le même paratope (spécifique de la cytokines)? Edited May 31, 2020 by LeBlaireau Quote
Membre d'Honneur Solution windu Posted May 31, 2020 Membre d'Honneur Solution Posted May 31, 2020 On 5/30/2020 at 11:01 AM, LeBlaireau said: Quand on fait une cytométrie en flux pour quantifier la sécrétion de cytokines, j'ai du mal à comprendre pourquoi on a besoin d'un Ac de capture ET d'un Ac de détection, chacun couplés à un fluorochrome different. Expand Salut ! En fait, ton premier AC1 est de capture comme t'as dit, donc il va se lier à la cytokine. Puisque tu cherches à quantifier les cytokines, elles doivent être le facteur limitant, donc tu mets des AC en excès. Du coup, tu ne peux pas t'arrêter là parce que tous tes AC1 ne vont pas se lier à tes cytokines, certains seront "libres", donc une fluorescence ne correspondra pas toujours à une cytokine. Tu vas donc rajouter un deuxième AC2, de détection, aussi en excès, qui va se lier au complexe cytokine-AC1. C'est la somme des fluorescences qui pourra alors t'indiquer la présence de cytokines. Pour faire un exemple, imaginons que AC1 et AC2 aient des fluorescences respectives dans le rouge et le vert. Là où tu n'as que du rouge, ce sont les AC1 en excès. Là où tu n'as que du vert, ce sont les AC2 en excès. Là où tu as du jaune (rouge + vert) tu auras des cytokines donc tu pourras évaluer leur quantité en fonction de l'intensité de la fluorescence (jaune). Quote
LeBlaireau Posted May 31, 2020 Author Posted May 31, 2020 D'accord merci beaucoupp @windu Du coup l'Ac 2 va se lier à la cytokine aussi ou au fragment Fc de l'Ac 1? Quote
Membre d'Honneur windu Posted May 31, 2020 Membre d'Honneur Posted May 31, 2020 On 5/31/2020 at 10:16 AM, LeBlaireau said: D'accord merci beaucoupp @windu Du coup l'Ac 2 va se lier à la cytokine aussi ou au fragment Fc de l'Ac 1? Expand Avec plaisir, et le deuxième AC va se lier à la cytokine aussi (ou au complexe cytokine-AC1) mais pas à l'AC1 seul, sinon il serait inutile ! Quote
Recommended Posts
Join the conversation
You can post now and register later. If you have an account, sign in now to post with your account.
Note: Your post will require moderator approval before it will be visible.