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étude des protéines


lauu
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Bonsoiir, 

 

- est ce que chaque chromatographie peut avoir une élution par palier et  gradient ou on va préférer un des deux 

dans le cours les schémas représentent une élution par gradient pour la chromato échangeuse d'ion ou hydrophobe, etc ce sont seulement des exemples ou c'est toujours comme ca?

 

- est ce que le gène de résistance procaryote est obligatoire ou non? et pour celui eucaryote, il n'est pas obligatoire, par exemple si on fait de la transgenèse additive, confirmation? (ou non?)

 

- dans la partie sur les séquences de clivage, à côté du Bromure de Cyanogène il est marqué qu'il coupe au niveau des Méthionines et entre parenthèse "ex insuline recombinante" 

cela signifie que pour produire l'insuline recombinante on utilise cette coupure? ou que justement elle possède des Méthionine et ainsi ce n'est pas réalisable?

 

merci d'avance pour votre aide!

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  • Ancien du Bureau
  • Solution

Salut ! 

 

- Pour les chromatographies, c'est une règle générale pour chacune donc tu dois pouvoir les distinguer à partir des graphes d'absorption types du poly (sauf échangeuse d'ion et hydrophobe, qui ont toutes deux un palier et des pics). 

 

- Pour le gène de résistance, ça dépend de ce que tu fais. Si tu pratiques autre chose que de la transgenèse additive, tu en auras toujours un, eucaryote ou procaryote, ça dépend de l'organisme où tu la produis. Si tu fais de la transgenèse additive, c'est en effet inutile, puisque tu ne vérifies pas la présence du transgène avant de réimplanter les ovocytes. 

 

- Le bromure de cyanogène est utilisé pour produire l'insuline recombinante (pour la chaîne B), comme indiqué sur le schéma suivant : https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/wuhs.png mais à mon avis c'est pas forcément à retenir, c'est juste un exemple

 

Bon courage 😉 

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merci beaucoup pour ta réponse! @windu

 

Le 28/05/2020 à 22:58, windu a dit :

- Pour les chromatographies, c'est une règle générale pour chacune donc tu dois pouvoir les distinguer à partir des graphes d'absorption types du poly (sauf échangeuse d'ion et hydrophobe, qui ont toutes deux un palier et des pics). 

juste, tu veux dire que du coup l’élution se fait tjrs pareil (gradient, pallier) pour chacune des chromatographie c’est ça? (ex: echangeuse d’ion TOUJOURS par gradient?) 

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  • Ancien du Bureau
il y a 5 minutes, lauu a dit :

merci beaucoup pour ta réponse! @windu

 

juste, tu veux dire que du coup l’élution se fait tjrs pareil (gradient, pallier) pour chacune des chromatographie c’est ça? (ex: echangeuse d’ion TOUJOURS par gradient?) 

 avec plaisir ! 

Oui c'est ça. Petit conseil, puisque chromatographies échangeuses d'ions et hydrophobes présentent le même aspect de chromatogramme, tu utilises leur diagramme d'élution pour les différencier : si l'éluant augmente, la force ionique (NaCl) augmente donc tu te trouves dans une échangeuse d'ions, sinon c'est une hydrophobe ! 🤗

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