lauu Posted May 28, 2020 Posted May 28, 2020 Bonsoiir, - est ce que chaque chromatographie peut avoir une élution par palier et gradient ou on va préférer un des deux dans le cours les schémas représentent une élution par gradient pour la chromato échangeuse d'ion ou hydrophobe, etc ce sont seulement des exemples ou c'est toujours comme ca? - est ce que le gène de résistance procaryote est obligatoire ou non? et pour celui eucaryote, il n'est pas obligatoire, par exemple si on fait de la transgenèse additive, confirmation? (ou non?) - dans la partie sur les séquences de clivage, à côté du Bromure de Cyanogène il est marqué qu'il coupe au niveau des Méthionines et entre parenthèse "ex insuline recombinante" cela signifie que pour produire l'insuline recombinante on utilise cette coupure? ou que justement elle possède des Méthionine et ainsi ce n'est pas réalisable? merci d'avance pour votre aide! Quote
Membre d'Honneur Solution windu Posted May 28, 2020 Membre d'Honneur Solution Posted May 28, 2020 Salut ! - Pour les chromatographies, c'est une règle générale pour chacune donc tu dois pouvoir les distinguer à partir des graphes d'absorption types du poly (sauf échangeuse d'ion et hydrophobe, qui ont toutes deux un palier et des pics). - Pour le gène de résistance, ça dépend de ce que tu fais. Si tu pratiques autre chose que de la transgenèse additive, tu en auras toujours un, eucaryote ou procaryote, ça dépend de l'organisme où tu la produis. Si tu fais de la transgenèse additive, c'est en effet inutile, puisque tu ne vérifies pas la présence du transgène avant de réimplanter les ovocytes. - Le bromure de cyanogène est utilisé pour produire l'insuline recombinante (pour la chaîne B), comme indiqué sur le schéma suivant : https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/wuhs.png mais à mon avis c'est pas forcément à retenir, c'est juste un exemple Bon courage Quote
lauu Posted May 30, 2020 Author Posted May 30, 2020 merci beaucoup pour ta réponse! @windu On 5/28/2020 at 8:58 PM, windu said: - Pour les chromatographies, c'est une règle générale pour chacune donc tu dois pouvoir les distinguer à partir des graphes d'absorption types du poly (sauf échangeuse d'ion et hydrophobe, qui ont toutes deux un palier et des pics). Expand juste, tu veux dire que du coup l’élution se fait tjrs pareil (gradient, pallier) pour chacune des chromatographie c’est ça? (ex: echangeuse d’ion TOUJOURS par gradient?) Quote
Membre d'Honneur windu Posted May 30, 2020 Membre d'Honneur Posted May 30, 2020 On 5/30/2020 at 6:39 AM, lauu said: merci beaucoup pour ta réponse! @windu juste, tu veux dire que du coup l’élution se fait tjrs pareil (gradient, pallier) pour chacune des chromatographie c’est ça? (ex: echangeuse d’ion TOUJOURS par gradient?) Expand avec plaisir ! Oui c'est ça. Petit conseil, puisque chromatographies échangeuses d'ions et hydrophobes présentent le même aspect de chromatogramme, tu utilises leur diagramme d'élution pour les différencier : si l'éluant augmente, la force ionique (NaCl) augmente donc tu te trouves dans une échangeuse d'ions, sinon c'est une hydrophobe ! Quote
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