Le-Roi-des-Glaces Posted May 26, 2020 Posted May 26, 2020 (edited) Salut ! Peut-on parler de purification de la protéine pour l'IP et le (GST) pull down ? Merci ! N'aie pas peur @AdamDeSagesse Edited May 26, 2020 by Le-Roi-des-Glaces Quote
Solution enerys4 Posted May 28, 2020 Solution Posted May 28, 2020 Coucou! En vrai, je sais pas trop mais je vais essayer de rĂ©pondre. Comme ça en mĂȘme temps, ça fait remonter le sujet; et si quelqu'un passe par lĂ il pourra venir complĂ©ter. Pour ces deux mĂ©thodes, tu isoles la protĂ©ine afin de l'analyser. La purification aussi permet d'extraire une protĂ©ine d'un Ă©chantillon. Mme Lajoie a aussi Ă©crit dans son cours que c'est le mĂȘme principe que la chromato d'affinitĂ©. Mais, si tu regardes dans le cours, Ă la fin tu ne rĂ©cupĂšres pas vraiment la protĂ©ine. Tu laisses la protĂ©ine avec la bille et tu fais un WB ou un dosage enzymatique. Donc pour moi, ce ne sont pas des techniques de purification mais plutĂŽt des techniques analytiques. D'ailleurs, Mme Lajoie ne mentionne Ă aucune moment le mot "purification" dans cette partie du cours. Mais lĂ ce n'est que mon avis. Donc soit quelqu'un passe par lĂ et a vraiment le problĂšme Ă cette question. Soit il faudrait envoyer un petit mail Ă Mme Lajoie pour lui poser directement la question. Quote
Le-Roi-des-Glaces Posted May 28, 2020 Author Posted May 28, 2020 Salut ! Déjà , merci pour ton intervention @AdamDeSagesse m'a trahi mdr Comme tu le dis si bien, on "isole la protéine afin de l'analyser", avec le WB et le SDS-PAGE notamment. Le truc, c'est que d'aprÚs une source dont la fiabilité n'est plus à démontrer, "la purification des protéines est une série de processus destinés à isoler une ou des protéines à partir d'un mélange complexe". Donc techniquement, si on suit la définition de wikipédia, l'IP et le gst-PD te permettent d'isoler et donc de purifier ... Quote
enerys4 Posted May 28, 2020 Posted May 28, 2020 Ca faisait un moment que j'avais vu ton sujet mais je voulais pas y rĂ©pondre parce que je savais pas trop. Mais comme personne rĂ©pondait, je trouvais pas ça cool alors je me suis dit que j'allais tout de mĂȘme tenter ^^ Tu as peut-ĂȘtre raison, c'est peut-ĂȘtre de la purification, mais je ne peux pas te le certifier Ă 100%. Le mieux serait que tu envoies un mail Ă Mme Lajoie. En plus elle est gentille, elle se fera un plaisir de te rĂ©pondre Si jamais tu le fais, n'hĂ©site pas Ă venir nous donner la rĂ©ponse sur le forum. Quote
Le-Roi-des-Glaces Posted May 28, 2020 Author Posted May 28, 2020 OK ! Je vais attendre, je les harcÚle un peu trop les profs de recherche xD Mais demain, si personne n'a su apporter une réponse "sûre", je m'en occupe Quote
Le-Roi-des-Glaces Posted May 30, 2020 Author Posted May 30, 2020 On 5/28/2020 at 3:47 PM, enerys4 said: Si jamais tu le fais, n'hésite pas à venir nous donner la réponse sur le forum Expand Et voilaaaaa ! "sur le fond, vous n'avez pas tort, mais je pense qu'il faut mettre une nuance, quand vous isolez la protéine par IP ou PULL down, vous ne l'isolez pas seule, car elle entraine avec elle les éventuels partenaires, donc je dirais plutÎt que l'on va l'enrichir." Quote
enerys4 Posted June 1, 2020 Posted June 1, 2020 On 5/30/2020 at 6:58 PM, Le-Roi-des-Glaces said: Et voilaaaaa ! "sur le fond, vous n'avez pas tort, mais je pense qu'il faut mettre une nuance, quand vous isolez la protéine par IP ou PULL down, vous ne l'isolez pas seule, car elle entraine avec elle les éventuels partenaires, donc je dirais plutÎt que l'on va l'enrichir." Expand Super! Comme ça on est sûr de la réponse! Bonne semaine à toi Quote
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