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Immunofluorescence directe/indirecte


Go to solution Solved by raphaelbarbier,

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Salut, concernant les techniques d'immunologie, j'ai pas bien compris la différence entre immunofluorescence indirecte et directe? Quelle est la différence entre les 2 ? Je confonds je crois 

Merci d'avance !!

 

Posted

Salut 

 

il y a 7 minutes, inest a dit :

Salut, concernant les techniques d'immunologie, j'ai pas bien compris la différence entre immunofluorescence indirecte

 

Direct c'st quand c est l ac reconnaissant l'ag qui est directement marqué `alors que pour l indirect le marquage viendra d'un Ac secondaire marqué dirigé contre l'Ac reconnaissant l'Ag 

  • Solution
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salut ! alors c'est très simple tu vas voir voir !  l'immunofluorescence direct correspond a la détection d'un anti-gene dans ton lysat bactérien par exemple, et pour faire ca tu doit incorporer un Anti-corps couplé a un fluorochrome (vert par exemple) qui va se fixer spécifiquement ce fixer a ton Ag en question, et bam lumière vert, t'a reussi ton l'immunofluorescence direct. 

Pour l'indirect c'est un peu plus complexe car au lieu d'avoir comme but de mettre en évidence un Ag tu cherche a savoir si tu as présence ou non d'un Anti-corps "X" spécifique quelque part dans ton lysat, là tu vas donc sélectionner un anti-corps spécifique de "X" qu'on va appelé anti-corps "Y" (aussi nommé anti-corps anti-X)  et ce derniere sera aussi couplé a un fluorochrome (comme pour l'immunofluorescence direct) et quand ton le met dans le lysat tu vas avoir la liaison "Ac-X - Ac-Y - Fluorochrome" et bam lumiere aussi ! 

Ce que tu dois retenir c'est  que en l'immunofluorescence direct on cherche a deceler un ANTIGENE et en l'immunofluorescence indirect on cherche a deceler un ANTICORPS. voila jspr t'avoir éclairer

il y a 2 minutes, inest a dit :

Et l'ag doit être membranaire ou pas forcement ? 

 

non pas forcement ! il peut tres bien etre en suspension dans ton lysat, pour les Ag mb on utilisera plutot des technique de type cellElisa

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