CRISPR-Cas9

[SaraB]

Bonjour, j'ai une question concernant le système CRISPR-Cas9 avec les KI et KO, je ne comprends pas pourquoi le modèle KO nécessite deux ARN guides ciblant chacun un allèle du gène cible alors que le KI n'en nécessite qu'un qui cible directement les deux allèles du gène cible

 

Merci d'avance

Edited May 18, 2020 by SaraB

[AliceDeNice]

Salut !

Ce qu'il faut comprendre c'est qu'il suffit d'un seul allèle pour qu'un gène s'exprime. Pour un KO on veut que le gène ne s'exprime plus du tout, on est donc obligé de cibler les 2 allèles, il faut donc 2 ARN guides. Pour un KI, vu que l'on rajoute quelque chose, et qu'il suffit qu'il soit sur au moins un allèle pour s'exprimer, on peut se contenter de modifier qu'un allèle (et donc utiliser qu'un seul ARN guide).

Je ne sais pas si je suis claire, dis le moi si ce n'est pas le cas  

[SaraB]

@Alicebrdnt ah d'accord mais ce n'est pas parce que l'on présente le gène sur un allèle qu'il s'exprimera forcément si ? Je veux dire, dans le cas du KI, comment sait-on si c'est cet allèle qui va s'exprimer et pas l'autre ? 

 

Merci en tout cas !

Edited May 19, 2020 by SaraB

[Hypnos]

8 minutes ago, SaraB said:

ah d'accord mais ce n'est pas parce que l'on présente le gène sur un allèle qu'il s'exprimera forcément si ? Je veux dire, dans le cas du KI, comment sait-on si c'est cet allèle qui va s'exprimer et pas l'autre ? 

il suffit de l'intégrer avec un promoteur qui permet une surpression 

le plus souvent, on fait un Ki quand la fonction est déficiente ou absente, donc il n'y a pas de gêne avec l'expression de l'autre géne

[SaraB]

@Hypnos ah d'accord, merci beaucoup !