Benj152 Posted May 14, 2020 Share Posted May 14, 2020 Salut, j'ai parfois du mal à savoir si une fois un cDNA inséré dans un vecteurs par des enzymes de restriction, pourra être à nouveau sorti (intégralement ou pas) ou pas du vecteur par des enzymes Si quelqu'un peut essayer de m'expliquer c'est cool! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Metallica Posted May 14, 2020 Share Posted May 14, 2020 Slt il y a 25 minutes, Benj152 a dit : alut, j'ai parfois du mal à savoir si une fois un cDNA inséré dans un vecteurs par des enzymes de restriction, pourra être à nouveau sorti (intégralement ou pas) ou pas du vecteur par des enzymes Est ce que tu as un exemple de qcm parce que généraliser ça c'est pas vraiment possible Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Benj152 Posted May 14, 2020 Author Share Posted May 14, 2020 En cherchant des exemples, j'ai re essayé plusieurs fois, et en faite j'ai trouvé (je me suis rappelé) comment faire aha ^^ dsl et merci quand même @Metallica ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Metallica Posted May 14, 2020 Share Posted May 14, 2020 Bon bah nickel x) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Benj152 Posted May 22, 2020 Author Share Posted May 22, 2020 Le 14/05/2020 à 17:34, Metallica a dit : Bon bah nickel x) Re @Metallica !! Ok je pensais avoir compris comment faire, ma technique avait l'air de fonctionner, mais je suis tombé sur un QCM, je me suis loupé et je comprends pas comment résoudre ça.. QCM 1 : On cherche à intégrer le cDNA du gène X dans un vecteur. L’insert a donc été préparé avec les enzymes VicII et ExI. Le vecteur possède un polylinker avec les enzymes suivantes : CamIII, TaxI, HopI et AngI.Les sites de restrictions de ces enzymes sont les suivants : VicII : A/TGCAT ExI : TTGCA/A CamIII : A/TCGAT TaxI : T/CGA HopI : A/TGCAT AngI : TTGCA/A D. Une fois l’insert correctement inséré dans le vecteur, on pourra utiliser TaxI pour le libérer à nouveau C'est compté vrai Il me semble qu'ici l'insert peut s'y mettre qu'avec Hop et Angl Du coup mon raisonnement c'était d'afficher et quoi ça aurait l'air une fois insérer, donc ça : ATGCATTTGCAA (+ le complémentaire). Donc pour moi, pour libérer à nouveau il fallait qu'il y est la séquence de TaxI dans cette séquence, mais elle y est pas, l'item est compté juste et d'après le truc errata poly y'a pas d'errata Voila j'espère que tu pourras m'aider encore sur ce coup! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Metallica Posted May 22, 2020 Solution Share Posted May 22, 2020 Salut @Benj152 Il y a 5 heures, Benj152 a dit : je me suis loupé Non tu ne t'es pas loupé Il y a 5 heures, Benj152 a dit : l me semble qu'ici l'insert peut s'y mettre qu'avec Hop et Angl Du coup mon raisonnement c'était d'afficher et quoi ça aurait l'air une fois insérer, donc ça : ATGCATTTGCAA (+ le complémentaire). Donc pour moi, pour libérer à nouveau il fallait qu'il y est la séquence de TaxI dans cette séquence, mais elle y est pas, l'item est compté juste et d'après le truc errata poly y'a pas d'errata Yup et tu as totalement raison on ne pourra pas libérer l'insert avec cette ER Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Benj152 Posted May 22, 2020 Author Share Posted May 22, 2020 @Metallica Ouf! Merci!! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Benj152 Posted May 24, 2020 Author Share Posted May 24, 2020 (edited) Hola @Metallica ! J'ai une petite question sur ça toujours, pour commencer la journée C'est sur une colle de cette année en recherche Sachant qu'on a pu insérer dans ce cas le cDNA digéré par PstI et SfbI dans le plasmide digéré par SfbI PstI :5’...CTGCA/G...3’ SbfI :5’...CCTGCA/GG...3’ La question E est : Une fois le cDNA de FAH muté inséré correctement dans le plasmide, on pourra retirer le cDNA du plasmide par l’action de PstI Elle est compté vrai je suis dacc, mais dans la correction ils rajoutent : Après digestion par PstI ou SbfI, le plasmide se retrouvera nécessairement dans cette situation. Ainsi, après l’ajout du cDNA, Il y aura toujours l’apparition de site de restriction pour PstI (à noter que si on avait dit dans l’énoncé que l’on souhaitait retirer le plasmide à l’aide de SbfI, la réponse aurait été fausse car le site de restriction ne serait pas forcément apparu) (Je te mets le lien au cas où parce qu'ils ont expliquer avec un schéma (dernière page) : https://tutoweb.org/tat_librairie/Rangueil/Colles/S2/2019-2020/Correction colle n°22 04.05.20 (Recherche, ICM).pdf Mais pour moi, avec SbfI on peut le retirer. T'en penses koa ? (En faite je pense aussi que sur leur schéma ils ont oublié un C tout à gauche et un G tout à droite sur la ligne du haut ?) Edited May 24, 2020 by Benj152 Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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