syncytio13 Posted May 13, 2020 Share Posted May 13, 2020 Salut ! Est-ce que l'on peut trier des cellules avec une immunoprécipitation lorsque l'Ag d'intérêt est à la membrane ? Comme ici l'item 5D compté vrai du CCB purpan 2012... https://zupimages.net/viewer.php?id=20/20/fg06.png J'ai retrouvé un item du même type que le 6C dans la colle d'il y a quelques semaines et j'aurai aimé une petite confirmation. Quand on a seulement un SDS-page à notre disposition, on ne peut pas conclure si oui ou non les Ac utilisés peuvent reconnaître des épitopes conformationnels ? donc on doit répondre faux dans ces cas là ?? Comme ici le 6C compté vraihttps://zupimages.net/viewer.php?id=20/20/qwkq.png D'après les résultats expérimentaux, qu'est-ce qui montre que le récepteur est à activité tyrosine kinase (item 7D)? https://zupimages.net/viewer.php?id=20/20/gxal.png Merci d'avance ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Metallica Posted May 13, 2020 Solution Share Posted May 13, 2020 (edited) Bonsoir @syncytio13 il y a une heure, syncytio13 a dit : Est-ce que l'on peut trier des cellules avec une immunoprécipitation lorsque l'Ag d'intérêt est à la membrane ? Peut-être que c'est possible si on arrive à mettre les différentes cellules en suspension et que l'on dispose d'une bille bien plus lourde que les cellules utilisées x) ...mais bon perso j'ai jamais vu ça nulle part et dans ce genre de situation, la cytométrie en flux est largement favorisée il y a une heure, syncytio13 a dit : 'ai retrouvé un item du même type que le 6C dans la colle d'il y a quelques semaines et j'aurai aimé une petite confirmation. Quand on a seulement un SDS-page à notre disposition, on ne peut pas conclure si oui ou non les Ac utilisés peuvent reconnaître des épitopes conformationnels ? donc on doit répondre faux dans ces cas là ?? Alors effectivement on ne peut pas le savoir pour un mélange d'Ac polyclonaux, dans ce cas-là, il faudra le compter comme faux. Par contre pour ce qui est des Acmc pris individuellement, si on voit une bande en immunotransfert, ça veut dire qu'ils reconnaissent exclusivement des épi séquentiels il y a une heure, syncytio13 a dit : Comme ici le 6C compté vrai Ici je le mettrai faux à cause de l'antisérum,s'il n'y avait eu que les Acmc alors il aurait été vrai il y a une heure, syncytio13 a dit : D'après les résultats expérimentaux, qu'est-ce qui montre que le récepteur est à activité tyrosine kinase Ici il manque effectivement une expérience montrant ce que l'on détecte sans l'utilisation du ligand. Y a que comme ça qu'on peut en déduire l'activité tyrosine kinase du récepteur (même si bon on s'en doute vu les bandes correspondant aux tyrosines phosphorylées) Voilou Edited May 13, 2020 by Metallica Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
syncytio13 Posted May 13, 2020 Author Share Posted May 13, 2020 Salut ! Merci pour ta réponse ! @Metallica il y a 3 minutes, Metallica a dit : on dispose d'une bille bien plus lourdes Alors j'ai regardé dans le poly et on peut trier des cellules avec une bille magnétique ! Par contre, là dans l'item on dit immunoprécipitation et ça me dérangeait mais je suppose que l'on peut considérer un puit avec des Ag comme une immunoprécipitation... il y a 7 minutes, Metallica a dit : Acmc pris individuellement, si on voir une bande en immunotransfert, ça veut dire qu'il reconnaisse exclusivement des épi séquentiels Ben merci parce que j'avais complétement zappé ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Metallica Posted May 13, 2020 Share Posted May 13, 2020 il y a 26 minutes, syncytio13 a dit : Alors j'ai regardé dans le poly et on peut trier des cellules avec une bille magnétique ! Oui c'est la cytometrie en flux il y a 27 minutes, syncytio13 a dit : Par contre, là dans l'item on dit immunoprécipitation et ça me dérangeait mais je suppose que l'on peut considérer un puit avec des Ag comme une immunoprécipitation Je suis d'accord avec toi c 'est pas du tout orthodoxe et je l'ai jamais vu tomber en annales Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
syncytio13 Posted May 13, 2020 Author Share Posted May 13, 2020 @Metallica ça marche, merci beaucoup pour tes réponses Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Metallica Posted May 14, 2020 Share Posted May 14, 2020 De rien ;)) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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