pacesornotpaces Posted May 8, 2020 Share Posted May 8, 2020 Bonsoir! J'ai du mal à comprendre comment fonctionnent Eli spot et le cell elisa, ce à quoi ils servent et ce qu'ils visent en particulier. Par exemple cell elisa vise les Ag membranaires mais il me semble également qu'ils peuvent viser un Ag cytosolique non? Si c'est le cas, doit-on lyser la cellule par exemple? Et également, j'ai vu passer la notion d'épitope extracellulaire, est ce que l'on parle d'antigène membranaire ou alors d'autre chose ? Merci à celui ou celle qui me répondra! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Puromycine Posted May 8, 2020 Solution Share Posted May 8, 2020 (edited) Salut ^^ Alors, effectivement, tu as raison, le cellELISA est une technique qui permet de repérer des antigènes membranaires. On peut l'utiliser pour typer des cellules par exemple. En plus, en utilisant une technique ELISA, on pourra doser la quantité d'Antigène membranaire (l'activité de la peroxydase est proportionnelle au nombre d'Antigène). En gros, on fixe des cellule dans une cuve dans laquelle on va faire le protocole classique d'un test ELISA. Cependant, il ne me semble pas que le cellELISA puisse viser des antigènes cytosolique ! C'est à l'aide d'un test ELISA classique que l'on va réaliser des tests contre ces antigènes. Retiens que dans le test cellELISA, les antigènes sont membranaires ! L'ELISpot lui permet de doser la quantité de molécules produite par une cellule : par exemple, on peut imaginer doser la production d'insuline par les cellules du pancréas avec un ELISpot ! Pour cet exemple, il y aurait alors, fixé à la cuve, des anticorps dirigé contre l'insuline. On ajoute ensuite les cellules dans la cuve. Ensuite on lave la cuve (l'insuline est fixé aux anticorps et les cellules sont éliminées) avant de rajouter d'autres anticorps dirigé anti-insuline couplés à une enzyme. Et on pourra alors voir si il y a eu production et en quelle quantité ! Il y a 12 heures, pacesornotpaces a dit : Et également, j'ai vu passer la notion d'épitope extracellulaire, est ce que l'on parle d'antigène membranaire ou alors d'autre chose ? En effet, une protéine membranaire va avoir des épitopes intracellulaire (exposés seulement après la lyse de la cellule) et des épitopes extramembranaires ! Ainsi, lorsque l'on a un antigène membranaire, alors c'est que l'anticorps s'est fixé à un épitope extracellulaire ! En espérant t'avoir aidé, hésite pas à me relancer si tu as la moindre question ! Bon courage pour la suite Edited May 9, 2020 by Puromycine Erratum Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
pacesornotpaces Posted May 8, 2020 Author Share Posted May 8, 2020 @Puromycine c'est vraiment super merci beaucoup pour ta réponse! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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