EmmaTOM Posted April 29, 2020 Share Posted April 29, 2020 Bonjouuur, j'aurais 2 petites questions https://zupimages.net/viewer.php?id=20/18/4eyd.png - Je ne comprend pas la notion de "clonage orienté" dans l'item A et D - J'aimerais qu'on m'explique la E aussi Merciii beacouuuuuup Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Metallica Posted April 29, 2020 Share Posted April 29, 2020 (edited) Salut il y a 46 minutes, LucileMacBernik a dit : Je ne comprend pas la notion de "clonage orienté" dans l'item A et D Clonage orienté =insertion dans un seul sens Clonage non orienté = insertion possible dans le 2 sens :)) il y a 46 minutes, LucileMacBernik a dit : - J'aimerais qu'on m'explique la E aussi La condition pour que pour Cet item soit vrai ,c'est qu'EcoRI coupe deux fois au niveau du plasmide recombinant or tu peux voir qu il n y a initialement qu un seul site attaquable par cette ER et que l'insertion de l insert via BamHI ne crée pas le nouveaux sites reconnu par EcoRI donc à priori il est faux Edited April 29, 2020 by Metallica Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
EmmaTOM Posted April 30, 2020 Author Share Posted April 30, 2020 @Metallicadu coup j'avais oublié de mettre les réponses ahah, c'est le poly de Pâques de cette année et DE sont comptées vrais Mais du coup je comprend pas pourquoi la D est compté vraie, ça serait un clonage non orienté non ? Etsi j'ai bien compris, si on avait eu 2 sites sur le CDNA et que l'enzyme qui aurait coupé aurait eu les mêmes "bouts" que EcoRI ça aurait pu faire 2 fragments? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Metallica Posted April 30, 2020 Solution Share Posted April 30, 2020 (edited) Il y a 3 heures, LucileMacBernik a dit : Mais du coup je comprend pas pourquoi la D est compté vraie, ça serait un clonage non orienté non ? HindIII et NotI generent des sites non compatibles entre eux ce qui fait que le plasmide ne pourra s insérer que selon une seule orientation (HindIII avec HindIII et NotI avec NotI) Il y a 3 heures, LucileMacBernik a dit : Etsi j'ai bien compris, si on avait eu 2 sites sur le CDNA et que l'enzyme qui aurait coupé aurait eu les mêmes "bouts" que EcoRI ça aurait pu faire 2 fragments? En fait il faut juste savoir s'il y a 2 sites attaquables par EcoRI sur le plasmide recombinant pour liberer deux fragments . Dans ce genre de situations, les sites reassociés apres coupures par des ER,font souvent apparaître de nouvelles sequences reconnaissables par d autres ER. C est comme ca que j ai raisonné pour en conclure que l item était faux mais je n avais pas vu qu' il y avait tout simplement un site EcoRI a l intérieur du cdna du coup ça respecte les conditions pour obtenir deux fragments donc l item est juste :)) Edited April 30, 2020 by Metallica Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
EmmaTOM Posted May 1, 2020 Author Share Posted May 1, 2020 @Metallica aaaaah d'accord je comprend mieux Merci beaucoup Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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