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Prot entrainement


Glouglou
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 https://moodle.univ-tlse3.fr/pluginfile.php/335395/mod_resource/content/1/poly UE8 complet 2018-19.pdf

 

https://moodle.univ-tlse3.fr/pluginfile.php/387011/mod_resource/content/1/poly UE8 complet 2019-20 ok.pdf

 

Bonsoir ttb

j'ai un pb avec les items suivants sur les protéines

10 B

15 E

16 C

17 (entier si possible,)

19 DE

et une question: le SDS PAGE est il toujours réducteur? ou l'est il seulement avec le bétaME ...?

 😕 

Voilà il y a en a bp, merci pour votre aide quand même

 

Edited by Gusgus
lien pas bon
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  • Solution

Salut @Gusgus

 

il y a 13 minutes, Gusgus a dit :

10 B

 

Ce que nous montre ces résultats expérimentaux c'est que le PDGF-R  est un récepteur à activité tyrosine kinase qui s'autophosphoryle ( ou ses 2 sous-unités qui se transphosphorylent) et permet en aval une cascade de phosphorylation sur diverses protéines phosphorylées au niveau des tyrosines. On sait également qu'elle active la PI-3Kinase. En revanche rien ne nous dit qu'elle active une PKA d'autant plus que les PKA de manière générale ne sont pas directement activées par le récepteur mais plutot par des protéines phosphorylées intermédiaires.

 

il y a 19 minutes, Gusgus a dit :

15 E

 

On te dit dans l'énoncé (en dessous des SDS-PAGE) que quand on teste l'activité enzymatique de la protéine recombinante, on obtient un test négatif , test qui est normalement positif avec la protéine humaine du coup ça nous indique bien qu'elles n'ont pas la même structure tridimensionnelle,structure nécessaire à la bonne activité enzymatique.

 

 

il y a 26 minutes, Gusgus a dit :

16 C

 

On sait grace au QCM 15 que la protéine recombinante a un PM de 45kDa ..si on avait effectivement eu affaire à une dimérisation de celle-ci après action du déxaméthasone, on aurait obtenu une prot de 45*2=90kDa et non pas de 63kDa , de plus sachant qu'on utilise le SDS , agent supprimant les liaisons faibles, je pense que dans tous les cas , on n'aurait pas pu obtenir un recepteur dimérisé.

 

il y a 33 minutes, Gusgus a dit :

17 (entier si possible,)

 

 En gros c'est l'activité enzymatique de la protéine qui va libérer le cycle aromatique du mannose ce qui va permettre d'obtenir une DO à 408nm. Du coup :

 

A: Faux car il y a aussi le manoside, le p-nitrophényl mannoside et le nitrophényl , ce dernier étant à l'origine de la DO à 408nm du coup la protéine recombinante mais aussi ces 3 composés dont on n'aura pas la prot sous forme pure.

 

B: Vrai Le pic d'élution nous indique qu'on a une prot autour des 120-125kDa ce qui correspondrait effectivement à un dimère de protéines recombinantes glycosylées (2*63=126kDa)

 

C : Vrai La DO à 408nm nous montre qu'effectivement que la protéine a réussi à acquérir une structure tridimensionnelle lui permettant l'expression de son activité enzymatique (sous forme de dimère+glycosylation dans le système endo des cellules en culture)

 

D : Faux .On a bien vu dans le QCM 15 que le système procaryote ne marchait pas puisque le test de l'activité enzymatique de la prot recombinante était négatif contrairement au système eucaryote.

 

E. Vrai notre dimère de protéines recombinante sera séparé sous l'action du SDS et l'on se retrouvera comme dans le QCM 16 avec une bande à 63kDa en utilisant un Ac anti protéine recombinante.

 

il y a 52 minutes, Gusgus a dit :

19 DE

 

Et pour celle-ci je passe mon tour 😬

 

il y a 55 minutes, Gusgus a dit :

et une question: le SDS PAGE est il toujours réducteur? ou l'est il seulement avec le bétaME ...?

 

Il l'est toujours (suppresseur des liaisons faibles)

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19) 

D : Il faut repérer le point de ta droite coupé par la lipase II, en regardant a droite tu vois que la concentration est de 0,3 NaCl

E : On peut pas affirmer que la lipase I a un PM supérieur a la II parce que elle est pas pure (item A) donc on sait pas. 

 

SDS --> enleve liaisons faibles donc NON covalentes 

Beta-mercapto --> enleve liaisons fortes donc covalentes 

Conditions réductrices --> quand ils ajoutent ça dans un WB ça veut dire que les liaison covalentes ont été enlevé, donc pour les QCM de Perret il faut tenir compte que conditions réductrices =  Beta-mercapto

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