Le-Roi-des-Glaces Posted March 20, 2020 Share Posted March 20, 2020 Bonnnnjooouuurrr! Vite fait, bien fait : on avait eu une réponse de la part de la prof concernant l'item de colle sur la position de "charge / lavage / elution" sur le graph? Meeeerrrrrcccii! PS : dans le cas contraire, je lui enverrai un mail et ce sera plié ^^ PPS : sur le cours, on dirait que certains schémas se contredisent ... Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière TontonChène Posted March 22, 2020 Ancien Responsable Matière Share Posted March 22, 2020 Salut ! Non rien mais tu peux poser la question du moodle si tu le souhaites concernant cet aspect du cours car comme tu le dis les schémas ne sont pas clairs entre eux. Bon courage Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Le-Roi-des-Glaces Posted March 22, 2020 Author Share Posted March 22, 2020 Ok. Je lui demande demain et je vous tiens au jus ^^ Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Le-Roi-des-Glaces Posted April 1, 2020 Author Solution Share Posted April 1, 2020 (edited) Avec un peu de retard ! " Bonjour, Pour bien comprendre un diagramme d’élution, il vous faut imaginer que vous êtes au niveau du lecteur de DO qui est situé en sortie de colonne. J’essaie de vous expliquer ce qu’il se passe…. Une fois que votre échantillon est chargé dans la colonne, les protéines rentrent dans la colonne et commencent à se déplacer à l'intérieur de celle-ci. Vous ajoutez une solution de lavage, qui va permettre à l’échantillon de continuer son chemin dans la colonne. Les protéines qui doivent se fixer, se fixent sur le support, et les autres protéines continuent d’avancer pour finalement sortir.. Elles sortent en masse au départ (d’où le plateau) et progressivement il y en a de moins en moins qui sortent. Cela correspond au plateau qui finit par revenir sur une DO très basse qui correspond à la solution de lavage qui sort de la colonne. Puis vient l’étape d’élution, la solution d’élution est donc déposée sur la colonne, avance dans la colonne et permet de décrocher les protéines initialement fixées, qui finissent par sortir de la colonne. Elles sont détectées et de ce fait sur le chromatogramme le pic apparait Il y a donc un décalage entre le moment où vous déposez sur votre colonne et le moment ou cela apparait sur le graphe, ce décalage est visible quand le diagramme d’élution est indiqué sur le chromatogramme (image du chromatogramme de gauche que vous avez dans votre message et ci dessous). Si le diagramme d’élution n’est pas indiqué (diagramme de droite), on prend la base du pic comme cela est indiqué dans le chromatogramme de droite. Sur ce même diagramme, il est indiqué avec une flèche charge de l’échantillon, qui correspond de la même façon au début de la charge de l’échantillon. J'espère avoir répondu à votre question. Revenez vers moi si ce n'est pas le cas. " Donc je suis revenu vers elle " Pour être plus précis, il faudrait une flèche pour indiquer "début de la charge de l'échantillon" à la base du plateau. Le plateau correspondant à la sortie des protéines non retenues sur la colonne, suite au passage dans la colonne de la solution de lavage. Ne vous inquiétez pas, je pense que vous avez compris le principe du chromatogramme, je ne poserais pas de questions sur la position des différentes étapes de charge et de lavage. Courage à tous, ces temps sont durs... tous les enseignants de l'UE8 pensent à vous. " Voila ! Edited April 1, 2020 by IceKing Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière TontonChène Posted April 1, 2020 Ancien Responsable Matière Share Posted April 1, 2020 Parfait merci beaucoup @IceKing pour la question je vais mettre le sujet en favoris pour les autres paces puissent le voir. Encore merci ! et bon courage Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Aligot Posted April 1, 2020 Share Posted April 1, 2020 Merci @IceKing pour le partage Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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