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ADN recombinant


Go to solution Solved by nour8,

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Bonjour! 

Excusez-moi, par rapport à l'item 'Dans le vecteur d'expression ,il faut utiliser l'ADN genomique tel qu'il est dans l'organisme donneur pour etre sur de produire la meme proteine' Je voulais savoir quand est-ce qu'on va faire l'ADNc? Je veux dire, est-ce qu'on va faire toute une étape de transcription et de traduction in vitro puis inserer l'ADNc dans ce vecteur d'expression? 

Merci!

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  • Ancien Responsable Matière
  • Solution

Salut !
Alors juste un petit rappel (qui explique pourquoi cet item est faux) pour dire qu’on utilise de l’ADNc et pas l’ADN génomique pour différentes raisons : tout d’abord parce que avec l’ADNc on ne garde que les exons puisque les introns ne sont pas présents donc ça nous permet d’avoir un fragment plus court donc plus facile à utiliser mais cela permet aussi d’avoir la protéine exactement comme on l’a souhaité (puisque l’epissage aura déjà été réalisé au préalable) . Si on utilisait l’adn genomique directement on ne serait pas sur d’avoir l’epissage qui se fasse de la façon dont on le souhaite et on ne serait ainsi pas sur d’avoir la protéine d’interet comme voulue.

 

Pour obtenir l’ADNc on isole l’ARN  de l’organisme donneur et ensuite on fait agir une enzyme qui est la reverse transcriptase qui permet d’obtenir l’ADNc.

C’est cet ADNc qu’on insère enquire dans le vecteur .


En espérant que ce soit plus clair 💡 

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