Stark23 Posted March 1, 2020 Share Posted March 1, 2020 Bonjour je ne vois pas pour l'tem A comment on sait qu'il s'agit d'un clonage non orienté et je ne comprends pas non plus dans l'ADNc BPL comment il peut y avoir Sizo(0) et Sizo(1010) et en plus au milieu BamH1(400) Merci de votre réponse Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau Petit_Bateau Posted March 1, 2020 Ancien du Bureau Share Posted March 1, 2020 (edited) Saluuuut @Stark23, tout d'abord bienvenu sur le forum, c'est ton premier message Il s'agit d'un clonage non orienté car tu coupes avec la même enzyme donc tu vas pouvoir insérer ton fragment dans les 2 sens. Sizo, et BamH1 sont des sites de clivage, les chiffres entre parenthèses c'est simplement la localisation du site, et c'est à ces endroit que tu vas couper pour obtenir ton fragment avec la séquence d'intérêt et aussi là où tu vas couper dans ton plasmide pour apres y insérer le fragment que tu as prélevé précédemment. J'espère que c'est clair ? Edited March 1, 2020 by Petit_Bateau Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution enerys4 Posted March 1, 2020 Solution Share Posted March 1, 2020 La réponse de @Petit_Bateau est bonne mais je vais la compléter! Tu as deux types de clonage: l'orienté et le non orienté Le clonage est orienté lorsque tu coupes avec deux enzymes différentes. L'ADNc va donc pouvoir s'insérer dans le bon sens dans ton vecteur ouvert. Le clonage est non orienté lorsque tu coupes avec une même enzyme. L'ADNc peut alors se trouver dans le bon sens comme dans le mauvais sens dans ton vecteur. Dans l'item A, tu clives l'ADNc et le vecteur avec Sizo donc le clonage est non orienté. Ensuite, Sizo(0) signifie que l'enzyme de restriction Sizo coupe au niveau du nucléotide 0. Sizo(1010) signifie que l'enzyme clive au nucléotide 1010. Et l'enzyme BamH1 clive au niveau du nucléotide 220. En soit, une enzyme de restriction c'est une enzyme qui va reconnaitre des sites de restriction (un site avec une certaine séquence de nucléotide) et qui va pouvoir couper du coup l'ADN. Il est donc normal et indispensable de retrouver des sites de restriction sur le vecteur et sur l'ADNc. C'est ce qui permet en fait d'insérer ton ADNc dans ton vecteur... J'espère que ça répond bien à tes questions! Passe un bon dimanche Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien du Bureau Petit_Bateau Posted March 1, 2020 Ancien du Bureau Share Posted March 1, 2020 (edited) @enerys4 parfaitement dit ! Merci ! Edited March 1, 2020 by Petit_Bateau Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Stark23 Posted March 1, 2020 Author Share Posted March 1, 2020 Merci @enerys4 et @Petit_Bateau pour vos réponses elles sont très claires! Bon dimanche à vous! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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