Guest wistiti Posted January 1, 2020 Share Posted January 1, 2020 Bonjouuur alors est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer la technique de FRAP en microscopie car je ne suis pas sur d'avoir compris son fonctionnement et dans quelle situation l'utiliser, merci bcp a celui ou celle qui prendra le temps de repondre et bonne année !!! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière jeannou Posted January 1, 2020 Ancien Responsable Matière Share Posted January 1, 2020 Salut! Tu as fait exprimer dans ta cellule des protéines chimères X - GFP. Tu peux donc les visualiser en microscopie à fluorescence dans ta cellule vivante. Tu t'intéresse maintenant par exemple à la vitesse de diffusion de ces protéines d'un compartiment à l'autre de ta cellule. Prenons l'exemple du poly : la diffusion de la périphérine-GFP dans les axones. Tu vas donc réaliser un blanchiment/bleaching d'une partie de ton échantillon (ici de l'axone) grâce à un laser. Il n'y aura plus de signal fluorescent au niveau de cette portion. Tu vas ensuite observer la vitesse de retour de la fluorescence au niveau de cette portion, ce qui va te donner la vitesse de diffusion de la périphérine dans les axones neuronaux. Il vaut mieux utiliser cette technique en microscopie biphotonique que confocale car le bleaching est plus précis. Est ce que c'estplus clair? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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