SJr Posted December 29, 2019 Share Posted December 29, 2019 salut salut grosse incompréhension devant ce QCM: 1) en fait quand tu coupes dans la zone d'hybridation d'une sonde ça peut quand même le révéler ensuite ? 2) quelle différence entre couper du DNA et mettre du BET et faire un Southern Blot ? Révélation A) perso j'aurais dit une unique bande de 1kpb ? vu que le site de sonde A est coupé mais apparement c'est le cas uniquement en southern (B) du coup j'ai pas compris la diff entre South et juste du BET ... merci bcp Révélation Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Solution Moumou Posted December 29, 2019 Ancien Responsable Matière Solution Share Posted December 29, 2019 Salut @SJr, il y a 14 minutes, SJr a dit : 1) en fait quand tu coupes dans la zone d'hybridation d'une sonde ça peut quand même le révéler ensuite ? Oui, car la sonde peut s'hybrider avec les deux extrémités qui ont été coupées. il y a 14 minutes, SJr a dit : 2) quelle différence entre couper du DNA et mettre du BET et faire un Southern Blot ? Quand tu as tes fragments d'ADN (double brin) et que tu y ajoute du BET tu vas avoir un signal sous UV de tous les fragments sans exception. Le BET fait ressortir tout l'ADN de manière aspécifique. Il peut aussi fonctionner sur l'ARN en se plaçant au niveau des zones complémentaires (qui se sont hybridées entre elles) mais ça le professeur ne le précise pas, c'est juste pour expliquer comment fonctionne le BET. La sonde (d'un Southern) elle, s'hybride avec des zones particulières de l'ADN (simple brin), donc en fonction de la zones de clivage par les enzymes et de la zones d'hybridation de la sonde, certains fragments génèreront un signal et d'autres non. C'est un marquage beaucoup plus spécifique que le BET. il y a 14 minutes, SJr a dit : A) perso j'aurais dit une unique bande de 1kpb ? vu que le site de sonde A est coupé mais apparement c'est le cas uniquement en southern (B) du coup j'ai pas compris la diff entre South et juste du BET ... Vu que le BET va mettre en évidence TOUS les fragments, on aura bien une bande de 0,5 kb et une de 1kpb. Désolée pour le dessin débile, je pense que t'avais compris mais c'est au cas où. Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
SJr Posted December 29, 2019 Author Share Posted December 29, 2019 (edited) nope tkt déja, merci de ta réponse il y a 21 minutes, Moumou a dit : Quand tu as tes fragments d'ADN (double brin) et que tu y ajoute du BET tu vas avoir un signal sous UV de tous les fragments sans exception. Le BET fait ressortir tout l'ADN de manière aspécifique. Il peut aussi fonctionner sur l'ARN en se plaçant au niveau des zones complémentaires (qui se sont hybridées entre elles) mais ça le professeur ne le précise pas, c'est juste pour expliquer comment fonctionne le BET. ok dac c'est bien ce que j'imaginais le BET c'est "l'actinomycine de la réplication" eh oué c'est vrai qu'on pourrait le mettre sur de la tige boucle de RNA, pas maaall ce truc !! ah bah oui le BET il va partout du coup où y'a du double brin donc okay je comprends mieux merci merci EDIT: pourquoi la B est fausse alors ? - si je coupe via EcoR1 et BamHI, elle peut par la suite reconnaître un 0.5 et un 1 normalement, avec superposition de la B donc une bande dense en 1kpb et une bande plus claire en 0.5 ? EDIT 2 pas la bonne sonde, ça c'est l'item E bref... (merci) Edited December 29, 2019 by SJr Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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