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Guest Coyote wile

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Guest Coyote wile

Bonjour! Je ne comprend pas sur cet exemple comment en digérant par Sgf1 et Pme1 on parvient à préserver le cordon Stop puisque le site de l’ER est situé en plein milieu de TAA, on devrait perdre le STOP en digérant avec Pme1 avant l’insertion dans le plasmide non? https://goopics.net/i/lpvDA

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Salut ! 

En soit oui quand il y aura la digestion, le codon stop n'est pas vraiment préservé, mais quand il va s'insérer dans le plasmide vu qu'on utilise aussi Pme1 pour faire partir le gène létal, on aura certes la compatibilité des extrémitées mais vu que c'est les mêmes enzymes utilisées ça veut aussi dire que finalement on va récupéré la même séquence donc notre codon stop 😉

 

J'espère que c'est assez clair, n'hésite pas sinon 🙃

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