OxyGenS Posted December 23, 2019 Share Posted December 23, 2019 Bonsoir, J'ai relu plusieurs fois la page sur la technique des hybridomes mais cela reste pas très clair dans mon esprit. Qqun peut-il me la réexpliquer (peut-être de manière un peu différente qui pourrait me faire comprendre) svp ? Merci et bonne soirée. Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
OxyGenS Posted December 26, 2019 Author Share Posted December 26, 2019 Qqun ? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution baptistecherel Posted December 26, 2019 Solution Share Posted December 26, 2019 Bonjour, La premiere étape d'immunisation consiste à injecter des Ag à une souris afin de permettre la production d'Ac dirigé contre ce dernier. On récupère ensuite les lymphocytes B de sa rate que l'on fait fusionner avec un myélome murin (immortel) ce qui nous donne des hybridomes sécréteurs d'Ac. Mais cette fusion ne marche pas pour tous les hybridomes , certains n'ont pas fusionner il faut donc seulement sélectionner les cellules qui sont des hybrides LympphoycteB/myelome. On utilise pour cela un milieu sélectif qui ne permet la survie que de ces derniers. Apres l'étape de fusion et de selection on n'a donc que des hybridomes. On clone ensuite les hybridomes afin de les avoir en plusieurs exemplaires. Comme tous les hybridomes ne sécrètent pas des Ac dirigé contre le meme Ag on va procéder à un criblage ( par ELISA, ou immunofluorescence) afin de sélectionner uniquement les hybridomes qui sécrètent des Ac contre l'Ag avec lequel on a immuniser la souris lors de la premiere étape. Une fois qu'on a repérer ces hybridomes là on les fait se multiplier afin d'en avoir le plus possible. J'espère que c'est un peu plus clair pour toi...regarde bien les schemas du poly pour mieux comprendre Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
OxyGenS Posted December 26, 2019 Author Share Posted December 26, 2019 Merci @baptistecherel c'est bien plus clair mtn ! Juste une question : avant le criblage on a donc des hybridomes dirigés contre l'Ag injecté au début mais aussi pleins d'autres Ag déjà rencontrés par la souris c'est ça ? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
baptistecherel Posted December 26, 2019 Share Posted December 26, 2019 Il y a 6 heures, OxyGenS a dit : Merci @baptistecherel c'est bien plus clair mtn ! Juste une question : avant le criblage on a donc des hybridomes dirigés contre l'Ag injecté au début mais aussi pleins d'autres Ag déjà rencontrés par la souris c'est ça ? Oui puisqu'on pris tous les lymphocytes de la rate de la souris qui contenait donc des lymphocytes porteurs d' Ac dirigés contre d'autres Ag Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
OxyGenS Posted December 26, 2019 Author Share Posted December 26, 2019 Ok merci bcp Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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