Sanger

[Noel_Flantier]

Bonjour, pourrait on m'expliquer pourquoi l'item D est vrai ? (en sachant que l'item A est faux)

 

A partir de l’ADN génomique, vous analysez par séquençage (technique par électrophorèse sur gel) la région couvrant la partie 3’ de l’exon 3 et la partie 5’ de l’intron 3 du gène G, chez un individu normal et chez un patient P. Pour cela, vous utilisez une amorce qui s’hybride avec l’intron 3.

 

QCM 32. Vous disposez des enzymes de restriction suivants : AgeI 5’ A↓CCGGT 3’           BsrGI 5’ T↓GTACA 3’
 
En admettant que la séquence de la partie 3’ de l’exon 3 et que celle de la partie 5’ de l’intron 3 (analysées ci-dessus) ne se retrouvent nulle part ailleurs dans le gène G, vous pourrez distinguer sans ambiguïté l’individu normal et le patient P,  
 
A/ par analyse des produits de digestion par l’enzyme AgeI du transcrit 3 

B/ par analyse des produits de digestion par l’enzyme BsrGI de l'ADN génomique de la région couvrant la partie 3’ de l’exon 3 et la partie 5’ de l’intron 3 du gène G.  

C/ par analyse des produits de digestion par l’enzyme BsrGI du cDNA (double brin) correspondant au transcrit 3 à condition que le site de BsrGI soit inclus dans l’exon 3.

D/ par analyse des produits de digestion par l’enzyme AgeI du cDNA (double brin) correspondant au transcrit 1 à condition que le site de AgeI soit inclus dans l’exon 3.

E/ par Southern blot avec une sonde constituée par la séquence de l’exon 5, après fragmentation préalable de l’ADN génomique par une enzyme autre que AgeI ou BsrGI coupant dans l’intron 4.

 

Chez l’individu normal, un brin d’ADN a pour séquence : 5’…GTTACCTGTACA…3’ et chez le patient 5’…GTTACCGGTACA…3’

 

Un grand merci d'avance !

 

Edited July 22, 2020 by Noel_Flantier

[ballu]

salut JPCORRA, est ce que tu pourrais me dire où as-tu trouvé ce QCM, dans quelle annal, pour que je puisse y répondre correctement

[Moumou]

Salut @JPCORRA, 

L'item A est faux parce qu'un transcrit (ARN simple brin) ne peut pas être coupé par une endonucléase qui ne coupe que les séquences d'ADN double brin.

Si on t'avait proposé le clivage du gène par Agel, là tu aurais pu mettre l'item vrai.

 

Pour l'item D, car on te parle d'un cDNA double brin et on rajoute "à condition que la séquence soit dans l'exon 3" car si la séquence avait été dans l'intron, avec l'épissage, elle aurait été éliminée.

[Noel_Flantier]

@Moumou merci beaucoup de ta réponse !

Salut @ballu c'était le QCM 32 de la série des qcm d'annales sur les techniques du poly